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斑馬魚胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)檢測試劑盒

時間:2015/1/13閱讀:885
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斑馬魚胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)檢測試劑盒實驗步驟

1).水提?。悍Q取5kg用水沖刷干凈的鮮辣根(辣根皮中亦含有豐富的HRP),用菜刀切成小碎塊,在絞肉機中絞碎1~2次。碎渣漿用1倍體積的水低溫下攪拌提取(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干機(或離心機)甩干,收集濾液,碎渣再用1/4倍體積水浸泡提取1次,合并2次濾液,測得總體積。

2).硫酸銨分級分離:在不斷攪拌下,每1000mL濾液中慢慢加入226g硫酸銨粉末(相當于0.40飽和度,0℃),大約在1~2h內加完,置冷室中放置。次日將上清液小心地用虹吸管移出,下面混濁液以3 000r/min離心15min,棄沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸銨粉末(0.8飽和度)隨加隨攪拌,當硫酸銨全部溶解后,置冷室。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰凍離心機中以13000r/min離心20min,棄去上清液,收集沉淀。將沉淀懸浮于100~150mL蒸餾水中(加水量要使沉淀全部溶解為止),分裝于透析袋內,放在流動自來水中進行透析1~2天,直到硫酸銨透析完畢為止(可用5%乙酸鋇溶液或奈氏試劑進行檢查)。然后改換成用蒸餾水透析,中間更換2~3次,用0.1mol/L溶液檢查透析外液無氯離子為止。將透析液合并,在冰凍離心機中以4 000r/min離心15min,棄去沉淀,量上清液的體積。

3).丙酮分級分離:將上清液倒入燒杯并置冰鹽浴中,在不斷攪拌下,用細滴管沿杯壁加入1倍體積預冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰凍離心機中以4000r/min離心15min,棄去沉淀。上清液再加入0.8體積(按原上清液體積)-15℃丙酮,(操作同上),靜置后,在冰凍離心機中離心收集沉淀。將沉淀溶于少量蒸餾水中,透析除去丙酮??傻肦Z值近于1的酶溶液。

4).精制:將上步酶液適當稀釋,滴加1mol/L硫酸鋅溶液,使酶液中鋅離子濃度為10 -3 mol/L,5 000r/min離心10min,得上清液。再將沉淀用少量蒸餾水洗滌,離心,洗液與清液合并,分裝于透析袋內,用水透析除鹽,用微孔濾膜過濾,進行真空冰凍干燥(約得20mg),產品呈米黃色纖維狀松軟物,HRP產品的RZ值可達3.0左右,置真空干燥器中低溫保存。

斑馬魚胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)檢測試劑盒相關產品如下:xy-E12607 【中文名稱】:大鼠糖鏈抗原199(CA199)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Rats carbohydrate antigen 199 (CA199) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12608 【中文名稱】:大鼠腫瘤標志物(CA724)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Rat tumor markers (CA724) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12609 【中文名稱】:大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Lipoprotein rat phospholipase A2 (Lp-PL-A2) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12610 【中文名稱】:大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Heat shock proteins in rat 90 (HSP-90) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12611 【中文名稱】:大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Heat shock protein in rat 70 (HSP-70) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12612 【中文名稱】:大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Heat shock proteins in rat 40 (HSP-40) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12613 【中文名稱】:大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Heat shock proteins in rat 20 (HSP-20) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12614 【中文名稱】:大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Rat β-amyloid 1-40 (Aβ1-40) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12615 【中文名稱】:大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Cell cycle of rat hormone D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12616 【中文名稱】:大鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Cell cycle of rat hormone D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12617 【中文名稱】:大鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Cell cycle of rat hormone D1 (Cyclin-D1) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E12618 【中文名稱】:大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Rat myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL

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