（1）吸光度太高，一方面可能偏離朗伯比爾定律，吸光度變化不再呈線性關系；另一方面會導致吸光度變化不靈敏。因此，吸光度不宜太高。如果可以，盡量控制在1以下。
（2）構成本底吸光度是樣品提取液含有在該波長產生強烈光吸收的其它物質，或者在測定光吸收減少速率的反應中，人為添加的底物在該波長下造成的光吸收。
（3）如果是前者造成的，那么可以通過用對照再次調零，把本底光吸收消除。
（4）如果是后者，那么只能接受?；蛘呖头?，看看能否減少底物濃度。不過，大家知道，對于酶來說，底物濃度通常要求≥10Km。
至于吸光度超過分光光度計測量范圍，通常是兩種情況，紫外應該用石英比色皿，錯用了玻璃比色皿；或者比色皿不透光一面對著光源。其它情況還包括比色皿太臟，或者提取液本身顏色太深等。