調(diào)節(jié)性T細胞標記物研究進展

調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）是機體控制自身免疫及過度的炎癥反應(yīng)的重要調(diào)節(jié)因子。FoxP3（transcription factor Forkhead box P3）作為一類轉(zhuǎn)錄因子特異性表達于Treg細胞中，因此是Treg細胞典型的標記物。FoxP3的缺失能夠引起人與小鼠多種免疫紊亂疾病，內(nèi)分泌腺病、腸下垂等的發(fā)生。此外，在腸炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、紅斑狼瘡等疾病的發(fā)生過程中Treg的功能也受到了影響。
 
盡管FoxP3是Treg細胞非常重要的分子，然而它具體的分子機制卻仍不清楚。作為轉(zhuǎn)錄因子，F(xiàn)oxP3被發(fā)現(xiàn)能夠與多種配體結(jié)合調(diào)控下游基因的表達，比如FoxP3可以與FoxP1結(jié)合形成異源二聚體抑制IL-2的表達。此外，F(xiàn)oxP3也能夠與其它轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合發(fā)揮功能。
 
zui近，來自上海生科院的Bin Li等人在《PNAs》雜志發(fā)表了研究，揭示了DBC1（deficient in breast cancer 1）是FoxP3的配體，F(xiàn)oxP3與DBC1結(jié)合能夠抑制Treg的生理活性。
 
首先，為了尋找FoxP3的配體，作者將外源性的FoxP3蛋白連接一段親和標簽，隨后將其過表達于Jurkat細胞系中，并利用親和純化得到目的蛋白（包括FoxP3以及與之相互作用的配體物質(zhì)）。作者通過質(zhì)譜的方式鑒定出了FoxP3的存在，并同時鑒定除了相關(guān)的蛋白質(zhì)。其中包括之前已知的FoxP1以及之前未被報道的DBC1。之后，作者通過將FoxP3與DBC1共表達與HEK293T細胞系中，并利用免疫共沉淀的技術(shù)驗證了兩者之間存在相互作用。
 
為了研究DBC1的生理功能，作者構(gòu)建了DBC1缺失突變小鼠。作者將野生型小鼠與DBC1缺失突變小鼠的Treg細胞取出進行體外刺激，并觀察其FoxP3的表達情況。結(jié)果顯示：在受到TNF-a或者IL-6的刺激下，DBC-/-小鼠相比于野生型小鼠FoxP3的表達量明顯提高。之后，作者比較了兩類Treg細胞的抑制效應(yīng)。結(jié)果顯示，在未刺激狀態(tài)下，突變體Treg細胞相比于野生型細胞更加能夠抑制T細胞的活性；另外，在受到刺激之后（TNF-a或者IL-6），突變體Treg細胞的抑制活性相比于野生型Treg更加明顯。
 
之后，作者進行了小鼠模型試驗。結(jié)果顯示：在小鼠腦膜炎發(fā)生過程中，DBC1缺失小鼠相比于野生型小鼠其疾病指數(shù)明顯較低。隨后，作者分別將野生型小鼠警醒腦膜炎刺激，之后分別注入空白對照，野生型Treg細胞，DBC1缺失突變的Treg細胞。結(jié)果顯示：相比于野生型Treg的處理組，DBC1缺失的Treg處理更加能夠降低腦膜炎的疾病嚴重程度。隨后，作者在小鼠腸炎模型中也得到了相似的結(jié)果。
 
那么DBC1是如何通過調(diào)節(jié)FoxP3的活性來控制Treg細胞的生理功能呢？作者發(fā)現(xiàn)在受到TNF-a刺激后，細胞內(nèi)部FoxP3的表達量會明顯下降，而這一下降是由caspase8介導(dǎo)的。另外，在DBC1敲低的情況下，F(xiàn)oxP3的應(yīng)激性降解也得到了抑制。之后，作者利用小鼠Treg細胞得到了相同的結(jié)論。
 
綜上。作者發(fā)現(xiàn)了一類新的能夠與FoxP3結(jié)合的配體物質(zhì)：DBC1，該蛋白與FoxP3的結(jié)合能夠?qū)е缕浣到獠ui終影響Treg細胞的正常生理功能。