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上海信裕生物科技有限公司
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BW25113 Chemically Competent Cell

參   考   價(jià): 1200

訂  貨  量: ≥1  件

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時(shí)間:2020-09-02 15:43:08瀏覽次數(shù):884次

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純度 99.99% 供貨周期 現(xiàn)貨
規(guī)格 100μl/支 貨號(hào) XY9045
應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 主要用途 BW25113菌株來源于E. coli K-12 W1485,是K12的衍生菌株
BW25113 Chemically Competent Cell來源于E. coli K-12 W1485,是K12的衍生菌株,與MG1655類似,也是一種經(jīng)過較少改造,比較接近于“野生型"的大腸桿菌工程菌株。BW25113作為母系菌株,可以用來制作E. coli Keio Knockout 文庫(kù);同時(shí)可作為大腸桿菌模式菌株使用,用來制作各種基因的Knockout突變體。

BW25113 Chemically Competent Cell

產(chǎn)品規(guī)格 

BW25113:                                                    100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                     10μl

保存條件(保質(zhì)期):                         -80℃(6個(gè)月)

基因型

 

F-, DE(araD-araB)567, lacZ4787(del)::rrnB-3, LAM-, rph-1, DE(rhaD-rhaB)568, hsdR514

BW25113 Chemically Competent Cell產(chǎn)品說明

BW25113菌株來源于E. coli K-12 W1485,是K12的衍生菌株,與MG1655類似,也是一種經(jīng)過較少改造,比較接近于“野生型”的大腸桿菌工程菌株。BW25113作為母系菌株,可以用來制作E. coli Keio Knockout 文庫(kù);同時(shí)可作為大腸桿菌模式菌株使用,用來制作各種基因的Knockout突變體。另外,BW25113可用于構(gòu)建,擴(kuò)繁質(zhì)粒使用,不含核酸酶endA1突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時(shí)務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液盡量去除核酸酶,以防提取的質(zhì)粒被降解。pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>0.5×10cfu/μg DNA。

 

操作方法

1. BW25113感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心1分鐘收集菌體,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

 

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

2. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。

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