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純度	99.9	供貨周期	一周
規(guī)格	1*10^6cells/T25方瓶	貨號(hào)	XY-M208
應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁	主要用途	僅用于科研

MN9D (小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞)

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱	MN9D 小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞
細(xì)胞別稱	MN-9D
種屬來(lái)源	小鼠
組織來(lái)源	腦組織
生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
背景簡(jiǎn)介	通過(guò)融合來(lái)自14天齡C57BL/6J小鼠胚胎的嘴側(cè)中腦神經(jīng)元和N18TG2神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(一種A/Jax背景的交感神經(jīng)系統(tǒng)癌癥)產(chǎn)生了雜交的MN9D永生化多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞系。 MN9D細(xì)胞產(chǎn)生多巴胺(DA)并表達(dá)酪氨酸羥化酶(TH)以及芳香族氨基酸脫羧酶(AADC)。 MN9D細(xì)胞容易彼此聚集或與其他胚胎腦細(xì)胞聚集，并且可以使用磷酸鈣沉淀或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染未分化或分化的MN9D細(xì)胞被廣泛用于模擬多巴胺能神經(jīng)元，并測(cè)試與帕金森病中DA神經(jīng)元缺失相關(guān)的機(jī)制和潛在療法。先用丁酸或膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)再用丁酸分化，MN9D細(xì)胞僅部分再現(xiàn)了中腦DA神經(jīng)元的電生理特性。由于能夠表達(dá)酪氨酸羥化酶，并且能夠合成、釋放及吸收，因而被廣泛應(yīng)用于多巴胺能神經(jīng)細(xì)胞損傷模型的研究。
供應(yīng)限制	于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
細(xì)胞規(guī)格	1x106cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

STR profile
Markers:

Mouse STR 1-1	11,17
Mouse STR 1-2	17,19
Mouse STR 2-1	16
Mouse STR 3-2	13,14
Mouse STR 4-2	20.3,22.3
Mouse STR 5-5	15,17
Mouse STR 6-4	18,20
Mouse STR 6-7	12,17
Mouse STR 7-1	25.2
Mouse STR 8-1	16,17
Mouse STR 11-2	15,16
Mouse STR 12-1	16,17
Mouse STR 13-1	16.2,17.2,18.2
Mouse STR 15-3	22.3,23.3
Mouse STR 17-2	15,16
Mouse STR 18-3	16,22
Mouse STR 19-2	12,13
Mouse STR X-1	25,28,29

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

c、棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

d、待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

c、用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；

d、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過(guò)夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代。

9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動(dòng)物的治療等任何其他用途，不為任何個(gè)人提供產(chǎn)品和服務(wù)。以實(shí)際收貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)，網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)僅供參考。