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上海信裕生物科技有限公司
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人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒
  • 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒
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貨物所在地:上海上海

地: 中國/美國/德國

更新時間:2025-03-24 14:06:51

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人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒用于人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中人葡萄糖氧化酶(GOD)含量。價格公道,現(xiàn)貨供應(yīng)。

人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒

本試劑僅供研究使用 

試驗原理

GOD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知GOD濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將GOD和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中GOD的活性濃度呈比例關(guān)系。

 

試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制
96/48份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型
塑料膜板蓋1塊半塊即用型
標(biāo)準(zhǔn)品:400ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀
空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型
生物素標(biāo)記的抗GOD抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型
親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型
洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋
底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型

 

人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒自備材料

1.  蒸餾水。

2.  加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3.  振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

1.  避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2.  實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3.  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒操作注意事項

1.  試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

2.  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

3.  不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4.  使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

5.  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6.  洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7.  底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

8.  加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

9.  按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

 

樣品收集、處理及保存方法

1、  血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、  細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、  保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準(zhǔn)備

1.  標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:

400ng/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
200ng/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100ng/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50ng/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
25ng/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12.5ng/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0ng/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

 

2.  洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

 

人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒操作步驟

1.  使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

2.  根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3.  加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

4.  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

5.  每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

6.  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

7.  每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

8.  取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

9.  在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

性能

1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

4.局限性:6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。

 

 

結(jié)果 判 斷   

1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的GOD標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的GOD含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

 

3、檢測值范圍:0-400ng/ml

 

4、敏感度: 1.0ng/ml

xy-E10012    【中文名稱】:人β淀粉樣蛋白42( Aβ-42)ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human β-amyloid 42 (Aβ-42) ELISA Kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10013    【中文名稱】:人β淀粉樣蛋白40( Aβ-40)ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human β-amyloid 40 (Aβ-40) ELISA kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10014    【中文名稱】:人整合素αⅤβ1(ITG αⅤβ1)ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human integrin α Ⅴ β1 (ITG α Ⅴ β1) ELISA kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10015    【中文名稱】:人亞麻酸(LA)ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human linolenic (LA) ELISA Kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10016    【中文名稱】:人神經(jīng)元特異性烯化醇ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human neuron-specific ELISA kit allyl alcohol    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10017    【中文名稱】:人神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human neuron-specific enolase (NSE) ELISA kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10018    【中文名稱】:人血吸蟲ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human schistosome ELISA kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10019    【中文名稱】:人維生素B6ELISA試劑盒      【英文名稱】:Human vitamin B6ELISA kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10020    【中文名稱】:人正五聚蛋白3(PTX3)ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human pentraxin 3 (PTX3) ELISA kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10021    【中文名稱】:人維生素B9ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human vitamin B9ELISA kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10022    【中文名稱】:人維生素B12 ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human vitamin B12 ELISA Kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10023    【中文名稱】:人纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒    【英文名稱】:Fibrinogen degradation products (FDP) ELISA Kit    【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10024    【中文名稱】:人半胱氨酸蛋白酶抑制劑B(CSTB)ELISA試劑盒    【英文名稱】:Human cystatin B (CSTB) ELISA Kit    【靈敏度】:9.375pg/mL

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