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詳細(xì)介紹
GenomONE®-Neo EX 仙臺(tái)病毒包膜轉(zhuǎn)染試劑
可用于DNA、siRNA、ODN及蛋白轉(zhuǎn)染！
◆原理
待轉(zhuǎn)移的分子（如DNA，蛋白，Antisense Oligonucleotide, siRNA等）與HVJ-Envelope (HVJ-E) 混合后，形成了HVJ-E載體。利用病毒衣殼蛋白的侵染能力，在融合蛋白(F)的作用下，直接與細(xì)胞融合，將分子轉(zhuǎn)入目標(biāo)細(xì)胞或組織。
* HVJ-E：Hemagglutinating Virus of Japan Envelope。
** 現(xiàn)已有200多篇文獻(xiàn)使用該試劑盒，如需樣本案例，請(qǐng)向我司索取。
◆優(yōu)點(diǎn)、特色
目前市面上少有的轉(zhuǎn)染試劑盒，可用于細(xì)胞、組織和活體動(dòng)物?？捎糜冢?
siRNA
少量siRNA也可高效發(fā)揮敲除作用，無需化學(xué)修飾siRNA，高表達(dá)量。
DNA
無論序列長(zhǎng)短、線性或環(huán)狀均可
Oligonucleotides
DNA、RNA
蛋白
保持酶和抗體的功能性與特異性
體內(nèi)轉(zhuǎn)染 !!
大量操作和文獻(xiàn)引用證明HVJ-E載體可直接將目標(biāo)分子轉(zhuǎn)移到活體動(dòng)物產(chǎn)生作用。
高通量篩選
可同時(shí)轉(zhuǎn)染多種分子
1. 運(yùn)用范圍廣
GenomONE HVJ-E載體試劑盒可將多種分子（質(zhì)粒DNA、siRNA、寡核苷酸、蛋白、抗體等）轉(zhuǎn)進(jìn)培養(yǎng)細(xì)胞（貼壁和非貼壁細(xì)胞）和組織。也可用于敏感原代細(xì)胞和 活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染。每種領(lǐng)域的GenomONE®-Neo EX運(yùn)用情況，均有大量文獻(xiàn)報(bào)道。（如需文獻(xiàn)列表，請(qǐng)向我司索取）
2. 安全性
與陽離子脂質(zhì)體不同，GenomONE®-Neo EX是通過膜融合作用將分子導(dǎo)入細(xì)胞，而脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的內(nèi)吞作用可能造成轉(zhuǎn)染分子經(jīng)溶酶體作用而降解。GenomONE®-Neo EX內(nèi)含*滅活的HVJ病毒顆粒，其具有侵染力而無潛在增殖能力，使用非常安全，無需特殊的防護(hù)措施
3. 方便簡(jiǎn)單
GenomONE 即開即用，試劑盒內(nèi)包含了操作中主要使用的HVJ-E凍干粉和各種輔助試劑
◆案例、應(yīng)用
GenomONE®-Neo EX和傳統(tǒng)的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和電穿孔法相比，有更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性，可更有效的發(fā)揮siRNA的knock-down作用。
■ in vivo
【大鼠頜下腺逆行注射siRNA】
Ca2+-dependent Cl channel protein (rCLCA)表達(dá)的特異性抑制。
免疫染色
non-injection side rCLCA siRNA-injection side
rCLCA siRNA（2 nmol）和GenomONE-Neo（2AU）混合后，以逆行注射的方式注入大鼠頜下腺。四十八小時(shí)后，用免疫染色檢驗(yàn)siRNA注射對(duì)氯離子通道蛋白表達(dá)的抑制作用。
ST：紋狀管，G：顆粒曲管，A：腺泡
【相關(guān)文獻(xiàn)】
K. Ishibashi et al., J. Dent. Res., 85(12), 1101-1105 (2006).
■ in vitro
【難轉(zhuǎn)染細(xì)胞——U937細(xì)胞RNAi】
總所周知，用脂質(zhì)體和電轉(zhuǎn)的方法將siRNA轉(zhuǎn)到U937人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞中非常困難，但我們通過實(shí)驗(yàn)證明，siRNA與GenomONE-Neo結(jié)合后轉(zhuǎn)染該細(xì)胞，其knock-down效率可達(dá)85%以上。
♦ U937細(xì)胞經(jīng)siRNA轉(zhuǎn)染72小時(shí)后收集，用RT-PCR和WB分別檢測(cè)mRNA和蛋白量的變化情況。
Real-time PCR Western blotting
左圖：轉(zhuǎn)染Cathepsin G的特異性siRNA后，其對(duì)應(yīng)的mRNA減少到14%
右圖：轉(zhuǎn)染Cathepsin G的特異性siRNA后，其蛋白水平減少到15%
【相關(guān)文獻(xiàn)】
Y. Tsuchiya et al, Free Radical Biology & Medicine, 43, 1604-1615 (2007).
◆試劑盒組成
產(chǎn)品編號(hào) | 凍干 HVJ-E (滅活HVJ) | 試劑A (增強(qiáng)融合) | 試劑B (融合試劑) | 試劑C (增強(qiáng)導(dǎo)入) | 緩沖液 (用于懸浮和稀釋?) |
385-18731 | 1 vial | 1 vial | 1 vial | 1 vial | 1 vial |
381-18733 | 4 vials | 1 vial | 1 vial | 1 vial | 1 vial |
385-18736 | 40 vials | 10 vials | 10 vials | 10 vials | 10 vials |
◆產(chǎn)品列表
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 385-18731 | GenomONE® Neo EX（FD）轉(zhuǎn)染試劑套裝 | 1 set |
| 381-18733 | 4 sets | |
| 389-18734 | 16 sets | |
| 385-18736 | 40 sets |
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