二氧化碳培養(yǎng)箱日常保養(yǎng)你做的對嗎?

閱讀：2526發(fā)布時間：2020-3-17

　　二氧化碳培養(yǎng)箱原理是其通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如恒定的酸堿度(pH值：7.2～7.4)、穩(wěn)定的溫度(37℃)、較高的相對濕度(95%)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)，來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。二氧化碳培養(yǎng)箱廣泛應用于醫(yī)學、免疫學、遺傳學、微生物、農(nóng)業(yè)科學、藥物學的研究和生產(chǎn)，已經(jīng)成為上述領(lǐng)域?qū)嶒炇移毡槭褂玫某Ｒ?guī)儀器之一

　　一般細胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中重要的pH緩沖系統(tǒng))，所以大多數(shù)培養(yǎng)液用它來保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時，常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。對大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言，以為了維持穩(wěn)定的pH，培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間，以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時細胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣，以便于氣體的交換。

　　是不是采用其他pH緩沖系統(tǒng)就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了呢？人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低，如果細胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的HCO3-會被耗盡，這樣會影響細胞的正常生長。所以大部分動物細胞的培養(yǎng)，還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。

　　*的用戶對二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條基本的要求，一是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟?、二氧化碳濃度和濕度提供精確穩(wěn)定的控制，以便于其研究工作的進展；二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進行有效的防范，并且能夠定期消除污染，以保護研究成果，防止樣品損失。所以，選購二氧化碳培養(yǎng)箱的老師關(guān)心的當然就是其高可靠性、對污染的防范和控制及使用方便。

　　(一)溫度的控制

　　1.加熱方式：

　　氣套式加熱和水套式加熱，兩種加熱系統(tǒng)都是精確和可靠的，同時它們都有著各自的優(yōu)點和缺點。

　　水套式加熱是通過一個獨立的水套層包圍內(nèi)部的箱體來維持溫度恒定的，其優(yōu)點：水是一種很好的絕熱物質(zhì)，當遇到斷電的時候，水套式系統(tǒng)就可以比較長時間的保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準確性和穩(wěn)定性(維持溫度恒定的時間是氣套式系統(tǒng)的3～4倍)，有利于實驗環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制，或者經(jīng)常停電)并需要保持長時間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件的用戶選用。

　　氣套式加熱是通過遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對內(nèi)箱體進行加熱的，又叫六面直接加熱。氣套式與水套式相比，具有加熱快，溫度的恢復比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點，特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)的培養(yǎng)。此外，對于使用者來說氣套式設計比水套式更簡單化(水套式需要對水箱進行加水、清空和清洗，并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運作的情況)。

　　2.溫控系統(tǒng)：

　　保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細胞健康生長的重要因素，因此精確可靠的溫控系統(tǒng)是培養(yǎng)箱*的重要部分。為了使培養(yǎng)箱更加穩(wěn)定的工作，我們推薦用戶選用具備相互獨立三重溫度控制功能的二氧化碳培養(yǎng)箱，即箱內(nèi)溫度控制、超溫報警控制和環(huán)境溫度監(jiān)控。

　　我們知道培養(yǎng)箱的低工作溫度一般是高于室溫5℃，如果沒有緩慢加熱模式就非常容易在夏天高溫天氣(如室溫30℃左右時)產(chǎn)生箱內(nèi)溫度過高；如果有獨立超溫報警功能能夠快速準確的在培養(yǎng)箱內(nèi)溫度高于培養(yǎng)溫度1℃時，切斷培養(yǎng)箱的主加熱系統(tǒng)，同時聲光報警；環(huán)境溫度監(jiān)控可以根據(jù)環(huán)境溫度的變化自動調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱外門輔助加熱系統(tǒng)的功率，達到精確控制箱體內(nèi)溫度的目的。

　　3.溫度均一性：

　　二氧化碳培養(yǎng)箱箱體內(nèi)的溫度均一性也是用戶需要考慮的主要因素，一般在箱體內(nèi)配備了風扇以及風道的培養(yǎng)箱的均一度要好很多，同時此裝置還有助于箱內(nèi)溫度、CO2濃度和相對濕度的迅速恢復。

　　當然，風扇/風道的優(yōu)化也是同等重要的，二氧化碳培養(yǎng)箱*設計的大直徑風扇和循環(huán)風道能夠保證箱體內(nèi)溫度和二氧化碳濃度的均一性。大直徑風扇相比其他品牌培養(yǎng)箱的風扇，能夠在低轉(zhuǎn)速(低風速)時產(chǎn)生大的空氣循環(huán)流量，在達到均一性目的的同時，降低風速、減少箱內(nèi)震動。降低風速、減少震動同時也就大大提高了箱內(nèi)細胞培養(yǎng)的成功率。

　　-(二)二氧化碳濃度控制-

　　1.兩種控制系統(tǒng)：

　　紅外傳感器(IR)或熱導傳感器(TCD)進行測量。兩種傳感器都是準確的，但都各有優(yōu)缺點。熱導傳感器監(jiān)控CO2濃度的工作原理是基于對內(nèi)腔空氣熱導率的連續(xù)測量，輸入CO2氣體的低熱導率會使腔內(nèi)空氣的熱導率發(fā)生變化，這樣就會產(chǎn)生一個與CO2濃度直接成正比的電信號。

　　紅外傳感器(IR)它是通過一個光學傳感器來檢測CO2水平的。IR系統(tǒng)包括一個紅外發(fā)射器和一個傳感器，當箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后，傳感器就可以檢測出紅外線的減少量，而被吸收紅外線的量正好對應于箱體內(nèi)CO2的水平，從而可以得出箱體內(nèi)CO2的濃度。

　　由于IR系統(tǒng)是通過紅外線減少來確定箱內(nèi)CO2濃度，而箱體內(nèi)顆粒物能夠反射或部分吸收紅外線，使得IR系統(tǒng)對箱體內(nèi)顆粒物的多少比較敏感，因此IR傳感器應用在含HEPA高效空氣過濾器的培養(yǎng)箱內(nèi)比較合適。

　　2.CO2測量系統(tǒng)自動校準功能：

　　無論哪種CO2測量系統(tǒng)在使用一段時間后都會產(chǎn)生漂移，而產(chǎn)生漂移后直接會導致箱體內(nèi)二氧化碳濃度不能穩(wěn)定在我們的設定值，致使培養(yǎng)失敗，所以我們在這里強烈建議用戶在選購培養(yǎng)箱時必須要選擇帶有CO2測量系統(tǒng)自動校準功能的培養(yǎng)箱。

　　3.CO2濃度均一性：此點與溫度均一性的要求類似，在此就不做贅述。

　　-(三)相對濕度-

　　箱內(nèi)濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。維持足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復速度(如在開關(guān)門后)才能保證不會由于過度干燥而導致培養(yǎng)失敗。目前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過增濕盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對濕度水平可達95%左右，但開門后濕度恢復速度很慢)。

　　我們在此建議用戶在選購二氧化碳培養(yǎng)箱的時候盡量選擇濕度蒸發(fā)面積大的培養(yǎng)箱，因為我們知道濕度蒸發(fā)面積越大，越容易達到大相對飽和濕度并且開關(guān)門后的濕度恢復的時間越短。

　　-(四)防污染設計和消毒滅菌系統(tǒng)-

　　污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素，因而，二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生，其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面，并結(jié)合自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生。

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