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傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

RA-FLS類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

MDA-MB-415(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人狀腺原酸(T3)ELISA 試劑盒 Rabbit Anti-IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗豬IgG 0.1ml

GRM4： 促代謝型谷酸受體4抗體 EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照)

人小神經(jīng)膠質細胞HM 人腮腺炎病毒IgM ELISA 試劑盒 Rabbit Anti-IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗豬IgG 0.1ml

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TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 人腮腺炎病毒IgG ELISA 試劑盒 Rabbit Anti-IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗豬IgG 0.1ml

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marc-145-EGFP-puro(慢病毒構建穩(wěn)定株)猴胚胎腎上皮細胞 Marc-145-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin 大鼠絡絲蛋白(RL)ELISA試劑盒 ENA-78/CXCL5(Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78)  小鼠上皮中性粒細胞活化肽78 96T

OR10J3： 嗅覺受體家族10亞基J3抗體 TGFBI Others Human 人 BIGH3 / BIG-H3 / TGFBI 人細胞裂解液 (陽性對照)

貓腎細胞;CRFK 大鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 HO-2  大鼠血紅素氧合酶2 96T

RA-FLS類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞KAT2B： 組蛋白乙酰轉移酶PCAF抗體 PROK1 Others Human 人 EG-VEGF / prokineticin-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人視網(wǎng)膜muller細胞培養(yǎng)基 100mL 雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA 試劑盒 IAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)血清白蛋白 5mg

Phospho-c-Kit(Ser741)： 0酸化原癌基因c-kit抗體 NRK-52E，大鼠腎細胞 Sars蛋白表達株，293sars181A細胞 NCI-H1703 [H1703](人肺癌細胞)

IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照) 雞可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 IL-17(Interleukin-17) 白介素-17抗原 0.5mg

Phospho-c-Kit(Ser721)： 0酸化原癌基因c-kit抗體 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;Mao