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感覺態(tài)細(xì)胞
  • 感覺態(tài)細(xì)胞
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貨物所在地:上海上海市

地: 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

更新時(shí)間:2025-02-24 21:00:07

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感覺態(tài)細(xì)胞儲(chǔ)存條件: -70℃保存,必須加干冰運(yùn)輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個(gè)月。

購(gòu)買感覺態(tài)細(xì)胞客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品名稱

感覺態(tài)細(xì)胞

包裝

100ul*20

分類

克隆感受態(tài)細(xì)胞

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手撥EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

玉米赤霉烯酮快速檢測(cè)卡
萊克多巴胺(ractopamine)快速檢測(cè)卡
三聚氰胺(Melamine)快速檢測(cè)卡
鹽酸克倫特(瘦肉精)檢測(cè)卡
沙丁胺醇快速檢測(cè)卡

產(chǎn)品名稱
人類MTHFR和MTRR基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類ALDH2基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類CYP2C19基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類CYP2C9和VKORC1基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類CYP2D6基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類UGT1A1基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類TP53基因突變檢測(cè)試劑盒
結(jié)核分枝桿菌特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測(cè)試劑盒(IGRA)
核酸提取試劑盒(YC-A)
核酸提取試劑盒(YC-G)

黃曲霉PCR試劑盒

續(xù)斷苷B化學(xué)對(duì)照品HPLC≥95%20mg

感覺態(tài)細(xì)胞二氫大豆苷化學(xué)對(duì)照品HPLC≥95%20mg

氧化表小檗堿化學(xué)對(duì)照品HPLC≥95%20mg

寶藿苷V化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg

寶藿苷VII化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg

槐黃醇化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg

鴉膽子素 D化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg去氫紫堇堿化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg

1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg

丹參酮甲酯化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg

20R-人參皂苷Rg2化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg

三七素化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg

齒孔酸; 齒孔菌酸化學(xué)對(duì)照品HPLC≥96.5%20mg

馬兜鈴內(nèi)酰胺A化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。

 

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