一、背景
海馬是大腦顳葉內側的一個解剖結構，因為形狀類似海馬稱為海馬體。海馬體的主要組成基本單位是神經元，海馬神經元的生理功能與人的記憶密切相關。一些疾病會使海馬神經元出現(xiàn)損傷，比如常見的阿爾茲海默病、單純皰疹病毒性腦炎、自身免疫性腦炎等等，如果這些疾病出現(xiàn)，就會導致記憶障礙，甚至癡呆的表現(xiàn)。
神經細胞是近代神經學科中研究重點之一，神經細胞體外培養(yǎng)是指在體外模擬建立體內生長條件，使神經細胞或神經膠質細胞在其生存和生長并維持其形態(tài)和功能的方法。神經細胞體外培養(yǎng)技術已成為當今神經科學研究中的主要方法之一，與各種先進的技術結合在一起滲透到各個學科，但因神經細胞對體外培養(yǎng)條件要求條件較高難度大而又制約它的發(fā)展。
二、實驗步驟
1.無菌條件下，從懷孕18天的SD大鼠腹中取出胎鼠，放在預冷的無鈣、鎂的HBSS平衡鹽溶液中；
2.解剖顯微鏡下，看清海馬結構，剝去海馬上面的腦膜和血管；
3.加入0.05%胰酶-EDTA 消化液后放入 37℃孵箱內消化15分鐘，每5分鐘搖晃一次；
4.HBSS溶液洗三次；
5.在HBSS溶液中吹打10次左右，吹打過程中不能有氣泡；
6.所收集的上清過濾后，將細胞懸液于4℃1000rpm離心10min ，棄上清，管內加入種植液1重懸；
7.臺盼藍染色計數(shù)，以 3 x 104cells/孔種入包被的24孔板，37℃，5%CO2，95%飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。4-6小時后，全量換種植液2；
8.每周換液兩次，每次半量換液。
