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一、傳統CIA模型構建步驟（基于II型膠原蛋白）

1. 材料準備：

• II型膠原蛋白：溶解于醋酸（如5 mg膠原溶于10 mM醋酸，4℃過夜溶解）。

• 佐劑：與wan全弗氏佐劑（CFA）等體積混合，冰浴超聲乳化（2000 Hz），形成乳白色乳化液（現用現配）。

2. 免疫注射：

• shou次免疫：皮下注射乳化液至小鼠尾根部遠端（劑量100 μl/只，含200 μg膠原），注射后觀察局部反應。

• 加強免疫：shou次免疫后第21天，于原注射部位近端再次注射等量乳化液。

3. 模型評估：

• 臨床癥狀：shou次免疫后約27天出現爪部發(fā)紅，35天左右出現嚴重腫脹、關節(jié)僵硬（評分標準：0-4分，根據腫脹程度分級）。

• 病理檢測：通過HE染色觀察滑膜增生、炎性細胞浸潤、軟骨破壞等，或通過X光、MRI評估骨質侵蝕。

4. 適用品系：

• 敏感品系包括DBA/1、B10.RIII等，建議使用7-8周齡小鼠。

二、膠原抗體誘導模型（CAIA）的優(yōu)化方法

1. 原理與優(yōu)勢：

• 直接注射抗II型膠原單克隆抗體合劑（如A2-10、F10-21等），聯合低劑量LPS（脂多糖），繞過自身抗體生成，快速誘導關節(jié)炎（3-5天發(fā)病）。

• 優(yōu)點：

• 適用于CIA不敏感品系（如C57BL/6、BALB/c）及基因敲除小鼠。

• 發(fā)病率接近100%，病理特征與人類RA高度相似。

2. 操作要點：

• 抗體與LPS劑量：低劑量抗體合劑（如5-克隆抗體）聯合LPS注射，減少不良反應。

• 評估：HE染色顯示滑膜增生、炎性細胞浸潤及軟骨破壞（圖2示例）。

三、注意事項與對比

1. 品系選擇：

• CIA依賴MHC單倍型（如DBA/1），而CAIA適用于更廣品系（包括T/B細胞缺陷小鼠）。

2. 模型差異：

• 周期：CIA需35天以上，CAIA僅需數天至2周。

• 成本：CAIA試劑（單克隆抗體）成本較高。

3. 倫理與操作規(guī)范：

• 需遵守動物福利，定期監(jiān)測體重和活動能力，避免過度應激。

四、總結

• CIA模型：適合研究自身免疫反應，模擬RA慢性病程，但周期長、品系限制多。

• CAIA模型：適用于快速篩選抗炎藥物或基因研究，尤其對C57BL/6等品系效果xian著