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SYBR Green染料法(mRNA)

相對(duì)定量SYBR Green染料法：熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化，通過Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的分析對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析。我們公司供利用熒光定量PCR的方法對(duì)樣品中的基因表達(dá)情況進(jìn)行相對(duì)定量或定量分析的技術(shù)服務(wù)。

相對(duì)定量 (mRNA表達(dá)量分析)：基因表達(dá)的研究一般采用相對(duì)定量的方法。相對(duì)定量法對(duì)樣品的目的基因和內(nèi)參基因同時(shí)分別進(jìn)行定量，然后求出對(duì)于內(nèi)參基因的目的基因的相對(duì)量。通過對(duì)樣品間的目的基因的相對(duì)量進(jìn)行比較，可以對(duì)不同樣品間的mRNA進(jìn)行表達(dá)量分析。內(nèi)參基因通常選用表達(dá)量相對(duì)恒定的Housekeeping Gene，如：GAPDH、β-actin等。通過同時(shí)對(duì)內(nèi)參基因的實(shí)時(shí)檢測(cè)，可以對(duì)樣品之間由于起始細(xì)胞數(shù)不同、或RNA提取效率的不同等造成的RNA量誤差進(jìn)行校正，達(dá)到在嚴(yán)格意義上對(duì)樣品之間的mRNA表達(dá)量進(jìn)行分析之目的。

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