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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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過表達(dá)慢病毒構(gòu)建及包裝方法
一、過表達(dá)慢病毒構(gòu)建及包裝方法特點(diǎn)：
1. 直接包裝成為假病毒顆粒，對分裂和非分裂細(xì)胞均有感染作用，適合RNAi研究和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中難于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞 (比如神經(jīng)元細(xì)胞、干細(xì)胞或其它原代細(xì)胞)。
2. 可以通過簡單方式，在短時(shí)間內(nèi)獲得穩(wěn)定表達(dá)特定基因的多種細(xì)胞株。
3. 可用于基因敲除、基因治療和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究。
4. 無需轉(zhuǎn)染試劑，操作簡便。
5.可以根據(jù)客戶需要制備多種標(biāo)記。
二、過表達(dá)慢病毒構(gòu)建及包裝原理：
慢病毒（Lentivirus）是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種。構(gòu)建的siRNA / miRNA慢病毒載體，與化學(xué)合成的siRNA和基于瞬時(shí)表達(dá)載體構(gòu)建的普通siRNA載體相比，一方面可以擴(kuò)增替代瞬時(shí)表達(dá)載體使用，另一方面，Lentivirus-siRNA克隆經(jīng)過慢病毒包裝系統(tǒng)包裝后，可用于感染依靠傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑難于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系如原代細(xì)胞、懸浮細(xì)胞和處于非分裂狀態(tài)的細(xì)胞，并且在感染后可以整合到受感染細(xì)胞的基因組，進(jìn)行長時(shí)間的穩(wěn)定表達(dá)。
三、過表達(dá)慢病毒構(gòu)建及包裝流程：
1. 含有目的基因的慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建和質(zhì)粒純化提取。
注：客戶也可以提供構(gòu)建好的重組慢病毒表達(dá)載體。
2. 慢病毒表達(dá)載體與包裝系統(tǒng)共轉(zhuǎn)染病毒包裝細(xì)胞。
3. 收集病毒液。
4. 純化和濃縮病毒。
5. 分裝、- 80 oC保存。
6. 滴度測定及無菌檢測。
生物科技（上海）有限公司，主要實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)，細(xì)胞株，試劑盒等，如果您對我們產(chǎn)品感興趣或有疑問，您可以通過網(wǎng)頁咨詢我們的在線客服或致電，我們將熱情為您服務(wù)。
