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上海申知心生物科技有限公司

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[供應(yīng)]凝膠遷移實(shí)驗(yàn)(EMSA)
凝膠遷移實(shí)驗(yàn)(EMSA)
貨物所在地:
上海上海市
更新時(shí)間:
2024-11-06 21:00:33
有效期:
2024年11月6日--2025年5月6日
已獲點(diǎn)擊:
214
【簡(jiǎn)單介紹】凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)可以:(1)研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用;(2)可用于DNA定性和定量分析;(3)用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
【詳細(xì)說明】

凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)

凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù),可用于定性和定量分析。這一技術(shù)初用于研究DNA結(jié)合蛋白,目前已用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

通常將純化的蛋白和細(xì)胞粗提液和32P同位素標(biāo)記的DNA或RNA探針一同保溫,在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,分離復(fù)合物和非結(jié)合的探針。DNA-復(fù)合物或RNA-復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動(dòng)得慢。同位素標(biāo)記的探針依研究的結(jié)合蛋白的不同,可是雙鏈或者是單鏈。當(dāng)檢測(cè) 如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一類的DNA結(jié)合蛋白,可用純化蛋白,部分純化蛋白,或核細(xì)胞抽提液。在檢測(cè)RNA結(jié)合蛋白時(shí),依據(jù)目的RNA結(jié)合蛋白的位置,可用純化或部分純化的蛋白,也可用核或胞質(zhì)細(xì)胞抽提液。競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)中采用含蛋白結(jié)合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特異), 和其它非相關(guān)的片段(非特異),來確定DNA或RNA結(jié)合蛋白的特異性。在競(jìng)爭(zhēng)的特異和非特異片段的存在下,依據(jù)復(fù)合物的特點(diǎn)和強(qiáng)度來確定特異結(jié)合。



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