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廣州同譜實(shí)驗儀器有限公司
主營產(chǎn)品： kromasil色譜柱,通用石墨管,SPE固相萃取小柱 |
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主營產(chǎn)品： kromasil色譜柱,通用石墨管,SPE固相萃取小柱 |
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2020-12-16 閱讀(2760)
應(yīng)用簡介
本實(shí)驗采用固相萃取結(jié)合高效液相色譜串聯(lián)熒光檢測器（SPE-HPLC) 的方法，建立了香油中苯并芘殘留量的檢測方法。香油經(jīng)正己烷溶解，Cleanert Silica和Cleanert BAP-3固相萃取柱凈化，Venusil ASB C18色譜柱（4.6 × 250 mm，5 μm，150 Å）分離，水和乙腈為流動相進(jìn)行等度洗脫，外標(biāo)法進(jìn)行定量。結(jié)果表明，苯并芘添加量為0.1 mg/kg時，回收率在80% ~ 100%之間，能夠滿足檢測要求。——應(yīng)用編號：AF10098
苯并芘又稱苯并（α）芘，英文縮寫B(tài)aP，是一種常見的高活性間接致癌物和突變原。BaP存在于煤焦油、各類炭黑和煤、及焦化、煉油，瀝青、塑料等工業(yè)污水中。肉和魚中的BaP含量取決于烹調(diào)方法，水果、蔬菜和糧食中的BaP含量取決其來源。主要來自洗刷大氣的雨水水中的BaP以吸附于某些顆粒上、溶解于水中和呈膠體狀態(tài)等三種形式存在，其中大部分吸附在顆粒物質(zhì)上。BaP被認(rèn)為是高活性致癌劑，但并非直接致癌物，必須經(jīng)細(xì)胞微粒體中的混合功能氧化酶激活才具有致癌性。BaP不僅廣泛存在于環(huán)境中，而且與其它多環(huán)芳烴的含量不一定的相關(guān)性，長期生活在含BaP的空氣環(huán)境中會造成慢性中毒。許多國家的動物實(shí)驗證明，BaP具有致癌、致畸、致突變性。危險特性，遇明火、高熱可燃。受高熱分解放出有毒的氣體因此通過有效的實(shí)驗技術(shù)手段，對香油中的有關(guān)苯并芘殘留進(jìn)行監(jiān)控，以確保消費(fèi)者對食品消費(fèi)的安全具有重要意義。
本實(shí)驗通過優(yōu)化前處理方法建立了苯并芘在香油中的高效液相色譜方法。
實(shí)驗部分
儀器、試劑與材料
主要儀器設(shè)備
高效液相色譜儀（配熒光檢測器）
試劑材料
正己烷、二氯甲烷、乙腈均為色譜純；實(shí)驗用水為超純水；苯并芘標(biāo)準(zhǔn)品（純度99%）；一次性無菌注射器；針式過濾器PTFE(0.22 μm，直徑13 mm)；
Cleanert Silica固相萃取柱柱：500 mg/6 mL（貨號：SI5006）；Cleanert BAP-3固相萃取柱柱：500 mg/6 mL （貨號：Bap5006）
樣品制備
樣品處理
稱取香油0.5 g，置于12 mL樣品瓶中，加入3 mL正己烷，渦旋震蕩溶解，作為待凈化液。
樣品凈化
取Cleanert BAP-3萃取柱(500 mg/6 mL)，需在柱上串聯(lián)一只Cleanert Silica固相萃取柱，依次用5 mL二氯甲烷，5 mL正己烷活化小柱；將上述待凈化液上樣到小柱上，然后用2 mL正己烷潤洗樣品瓶，將潤洗液也上樣到柱上，先用5 mL正己烷淋洗串聯(lián)柱，待溶液*滴至Cleanert BAP-3上，將Silica硅膠柱棄去，再用5 mL正己烷淋洗Cleanert BAP-3柱，棄去淋洗液；后用5 mL二氯甲烷洗脫，收集；40℃氮?dú)獯蹈上疵撘?，? mL乙腈溶解定容，超聲10 s，過0.22 μm PTFE濾膜后進(jìn)HPLC檢測。
實(shí)驗條件：液相條件
色譜柱：Venusil ASB C18，5 μm，150 Å，4.6 × 250 mm
流動相：水︰乙腈= 12︰88
柱 溫：30℃
進(jìn)樣量：20 μL
流 速：1.0 mL/min
發(fā)射波長：406 nm；激發(fā)波長：384 nm
結(jié)果與討論
由表1可知，采用固相萃取結(jié)合高效液相色譜法檢測苯并芘的加標(biāo)回收率在80% ~100%之間，CV值小于10%，能夠滿足檢測要求。由圖可看出經(jīng)Cleanert Silica串聯(lián)Cleanert BAP-3柱凈化，采用Venusil ASB C18色譜柱檢測得到的苯并芘峰形良好，且保留時間穩(wěn)定。
實(shí)驗結(jié)果
表1. 香油中苯并芘實(shí)驗結(jié)果
物質(zhì)名稱 | 加標(biāo)量/(mg/kg) | 平均回收率/% | CV/% | RT/min |
苯并芘 | 0.1 | 90.2 | 2.2 | 8.41 |
結(jié)論
本實(shí)驗建立了香油中苯并芘殘留量的前處理方法，并結(jié)合高效液相色譜對香油中苯并芘的殘留量進(jìn)行了測定。對于加標(biāo)量為0.1 mg/kg的樣品進(jìn)行了檢測，回收率在80% ~ 100%之間，符合要求。
附：相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格描述 | 包裝數(shù)量 | 訂貨號 |
Venusil ASB C18 | 5µm，150Å，4.6×250mm | 1支 | VS952505-0 |
Cleanert BAP-3 | 500mg/6mL | 30支/pk | Bap5006 |
Cleanert Silica | 500mg/6mL | 30支/包 | SI5006 |
保護(hù)柱套 | 適用于4.6*10mm和2.1*10mm | 1支 | SH-100 |
直聯(lián)式保護(hù)柱芯 | 5µm，150Å；4.6*10mm | 4支/包 | VS950105-0S |
1.5 mL樣品瓶 | 短螺紋透明帶書寫處 32*11.6mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 mL樣品瓶蓋 | 9mm中心孔藍(lán)蓋，紅色橡膠/米色PTFE隔墊 45°Shore A; 1.0mm | 100/pk | 0915-1819 |
針式過濾器PTFE | 單膜，13mm，0.22µm | 100個/包 | AS041320-T |
一次性注射器 | 2 mL無針頭 | 100支/包 | LZSQ-2ML |
正己烷 | 4 L/瓶，色譜純 | 4×4 L/箱 | AH216-4 |
二氯甲烷 | 4 L/瓶，色譜純 | 4×4 L/箱 | AH300-4 |
乙腈 | 4 L/瓶，色譜純 | 4×4 L/箱 | AH015-4 |
SPE-M08正壓型多功能固相萃取裝置 | 8 通道 | 1 臺 | SPE-M08 |
15位氮吹儀 | 15位 | 1 臺 | NV15-M |
