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LCMSMS出峰靈敏度或重現(xiàn)性差?可能是這個原因導致的!??!
各位實驗猿在使用三重四極桿質譜聯(lián)用儀時,做MRM檢測偶爾會遇到出峰峰面積或峰高重現(xiàn)性差的問題。在排查了硬件部分如液相自動進樣器,MS噴針或者DL管后依舊找不出問題,崩潰到簡直要懷疑人生了……
我們知道一個峰是由若干個采集點描繪而成的,簡單來說Loop time就是從一個采集點開始采集到下一個點開始采集完成一次循環(huán)的時間(各個事件的時間總和)。
到底如何設定Loop time?
首先:我們得知道測定一個質譜需要20個點,所以我們應將循環(huán)時間設置為接近峰寬的1/20,比如:峰寬0.1min,設置循環(huán)時間為0.3sec。
如循環(huán)時間過長:則采集時間(Dwell time)變長導致采集點數(shù)不夠,峰形變差從而影響重現(xiàn)性。
如循環(huán)時間過短:則采集時間(Dwell time)變短導致采集精度不夠或不穩(wěn)定,影響靈敏度和重現(xiàn)性。
由此可知,Loop time的設置關鍵就是我們既要保證采集點數(shù)足夠,也要保證Dwell time時間足夠。
Dwell time對靈敏度到底有何影響?可參考下圖:
另外多說一句,如果測定化合物過多導致分配的Dwell time不夠的話我們可以根據(jù)保留時間分段進行采集哦。
這樣就不會互相影響,就像下圖: