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應(yīng)用MALDI高能和低能碰撞裂解技術(shù)研究二硫鍵重排
Ammodytoxins（Atxs）是長鼻蛇分泌的一種潛在的神經(jīng)毒素。Atxs（A、B 和C）通過刺激神經(jīng)末稍乙酰膽堿的釋放，從而抑制細(xì)胞分離引起細(xì)胞損傷、凋亡甚至死亡。Atxs 類毒素在氨基酸組成上具有很高的同源性，在組成毒素蛋白的122 個氨基酸中有177 個氨基酸殘基是相同的。在Atxs 類毒素中，14 個半胱氨酸形成7 個二硫鍵。 利用島津MALDI TOF-TOF，采用PSD（低能碰撞）和CID 模式（高能碰撞）對Atxs 多肽RCCFVHD 進(jìn)行分子內(nèi)氧化態(tài)和還原態(tài)二硫鍵研究，獲得更加豐富的結(jié)構(gòu)信息。甲酸切除處理經(jīng)過DTT 還原的Atxs 蛋白能夠獲得很好的序列覆蓋度；在所研究的多肽中，高能CID 能夠很好的識別Atxs 的氨基酸序列信息；低能PSD 模式主要提供a-、b-和y-型離子信息；高能CID 能夠提高整個碎片離子的強(qiáng)度，并且通過d-和w-型離子的信息提供側(cè)鏈的相關(guān)結(jié)構(gòu)信息。