Cellulose DE-32 DEAE 纖維素 DE-32
小離子電量：0.88～1.08meg/dg（dg=dry gram，千克重）
蛋白容積：700mg/dg（蛋白體積是指0.01M ph8.5磷酸緩沖液—牛血清白蛋白）
蛋白容積/柱體積：140mg/ml
每升所需的離子交換劑㎏柱床體積：0.24（離子交換劑重量的數(shù)字考慮到溶脹，容易去除及使用過程中離子離子交換剩余顆粒）

Cellulose DE-32 DEAE 纖維素 DE-32

產(chǎn)品信息：

中文名稱：DEAE纖維素DE-32

英文名稱：DEAE cellulose DE-32；DEAE-Cellulose microgranular

其他名稱：二乙氨基乙基纖維素32；2-(二乙氨基)乙迷纖維素32

CAS號：9013-34-7

級別：柱層析

功能團(tuán)：二乙氨乙基

正常PH范圍：2～9.5 

小離子電量：0.88～1.08meg/dg(dg=dry gram，千克重) 

蛋白容積：700mg/dg（蛋白體積是指0.01M ph8.5磷酸緩沖液—牛血清白蛋白）

蛋白容積/柱體積：140mg/ml

每升所需的離子交換劑㎏柱床體積：0.24（離子交換劑重量的數(shù)字考慮到溶脹，容易去除及使用過程中離子離子交換剩余顆粒）

填料密度：0.20dg/ml（填料密度的狀態(tài)為0.05M PH7.5磷酸緩沖液）

性狀(以下信息僅供參考)：白色或微黃色顆粒狀或纖維狀。為中等堿度陰離子交換劑。對高相對分子質(zhì)量聚合電解質(zhì)有較好的解析。游離堿型。典型吸收值 (胰島素相對分子質(zhì)量12000)850mg/g、(牛血清蛋白)660mg/g。

用途：本品僅供科研，不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)用于柱色譜分析，用以分離提純多糖、肽、核苷酸、酶、血清組分和病毒等，陰離子交換填料

Cellulose DE-32 DEAE 纖維素 DE-32   

層析柱裝填

1. 吸附性層析一般建議裝填高度為 10~15cm 高，分子篩建議裝填高度為60~90cm

1）組裝柱（如有需要連接裝柱器）。

2）取下下柱頭用裝柱緩沖液沖洗柱底適配器，排除篩網(wǎng)下面的氣泡，將下柱頭安裝

在層析柱底部，旋緊調(diào)整旋鈕，并在層析柱底部保留 1cm 左右高度的液體。

3）用裝柱緩沖液重懸介質(zhì)，制成 50%~75%左右的介質(zhì)懸浮液。

4）一次性將介質(zhì)倒入柱管中，避免產(chǎn)生氣泡。

5）如連接有裝柱器，立即往裝柱器中緩慢加入裝柱緩沖液。將適配器或裝柱器上蓋

與層析系統(tǒng)相連接。

6）設(shè)定所需流速⁺，打開柱下端，啟動泵，進(jìn)行壓柱。

7）柱床穩(wěn)定后保持 30min 以上，關(guān)閉泵和底閥。

8）如連接有裝柱器，移除裝柱器后連接適配器。

9）調(diào)節(jié)適配器，使其固定在膠面上 0.5~1cm 處，并保證適配器入口充滿液體。

10）打開底閥，連接泵，繼續(xù)用設(shè)定的流速（注意壓力不要超過 0.3Mpa）繼續(xù)壓柱

待膠面高度保持不變，標(biāo)記此時膠面高度

11）暫停機(jī)器，關(guān)閉底閥，斷開柱頭入口，調(diào)低適配器至膠面下 3~5mm 處。封閉

上柱口，裝柱完成。

6、柱效測定

裝填好的層析柱可以通過測柱效的方式來評價裝柱效果。

• 柱效測定可以采用丙酮作為指示劑也可以采用NaCl作為指示劑，按照下表配

		制指示劑溶液和流動相。
			丙酮法測柱效	NaCl法測柱效
		樣品	1.0% （ v/v ） 丙	2M NaCl（溶于水）
			酮水溶液
		樣品體積	1.0%柱體積	1.0%柱體積
		流動相	水	0.4M NaCl水溶液
		流速	30 cm/h	30cm/h
		檢測器	UV 280 nm	電導(dǎo)率

 

• 計算柱效：

根據(jù)UV或者電導(dǎo)率曲線計算理論踏板高度（HETP）、理論塔板數(shù)（N）和非對

稱因子（As），公式如下：

HETP=L/N

N=5.54(VR/Wh)²

其中：VR=保留體積

Wh=半高峰寬

L=柱高

N=理論塔板數(shù)

VR和Wh的單位應(yīng)*；

As=b/a

其中：

a=  在10%峰高處的*個半

b=  在10%峰高處的第二個半

結(jié)果評價

由以上公式計算出的 HETP 的數(shù)值若小于三倍介質(zhì)平均顆粒大小 且非對稱因子在 0.8~1.8 則判定為層析柱狀態(tài)良好。對于不理想的 柱效需要分析原因甚至需要重新裝填層析柱。