1. 厭氧培養(yǎng)箱關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗(yàn);

　　2. 接上氣路并檢查氣路，為防止漏氣，必要時(shí)可在各接管處用密封膠粘合; 使用操作室厭氧環(huán)境形成：按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個(gè)無(wú)毒塑料袋; 通電源開照明燈，開溫控儀，調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度;

　　3. 開紫外線滅菌燈，室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理，滅菌時(shí)間按具體實(shí)驗(yàn).

　　4. 厭氧培養(yǎng)箱應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置，應(yīng)避免陽(yáng)光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備，放置平穩(wěn);將混合氣瓶、氮?dú)馄堪卜牌椒€(wěn)，并分別裝好減壓閥(含壓力表)，安置在適當(dāng)位置;

　　5. 操作室內(nèi)*次置換(氮?dú)庵脫Q)： A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口，另一頭插入塑料袋; B. 接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開氮?dú)饪刂崎y，厭氧培養(yǎng)箱使二只塑料袋充足氮?dú)?，關(guān)閉閥門，然后扎緊袋口; C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊; D. 把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸放于操作室內(nèi)，至全部放出。

　　6. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧，一小時(shí)后開美蘭指示劑,觀察其變色情況，不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;

　　7. 操作室第三次置換(混合氣體置換)： A.調(diào)換氣路打開混合氣閥進(jìn)氣，充氣時(shí)取樣室先抽真空，并隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣; B.混合氣充滿塑料袋后，關(guān)掉混合氣閥，并打開閥，使混合氣經(jīng)過(guò)流量計(jì)，調(diào)整流量計(jì)，流量為每分鐘10ml左右; C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi); D. 通過(guò)三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。

　　8. 厭氧培養(yǎng)箱操作室第二次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一次充氮過(guò)程，取樣室先抽真空，并注意隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣。