液相色譜柱是液相色譜的核心部件,它主要起到了分離作用。色譜柱同樣也是一個消耗品,在流動相沖刷的過程和樣品在分析的過程,填料損失和污染使得色譜柱的性能慢慢下降。所以,對于液相色譜尤其是常用的C18柱,需要在一定時間內(nèi)對其性能做一個評估,同樣,新的色譜柱也要對色譜柱做一個有效的體檢。
液相色譜柱的常見故障:
1、若操作過程發(fā)現(xiàn)壓力很小,則可能管件連接有漏,注意檢查。當(dāng)出現(xiàn)錯誤警告(各組件指示燈均為紅色),一般為漏液,其中一個感應(yīng)器中已有溶劑,漏液故障排除后,擦干,點(diǎn)擊On line操作界面中的Instrument/System Off,然后再點(diǎn)擊操作界面中的Instrument/System On即可。
2、連接柱子與管線時,應(yīng)注意擰緊螺絲的力度,過度用力可導(dǎo)致連接螺絲斷裂。柱接頭處易發(fā)生漏液,可能情況為接頭Fittings中間的管子未和接口處貼緊。不同廠家的管線及色譜柱頭結(jié)構(gòu)有差異,不要混用,必要時可使用PEEK管及活動接頭;
3、操作過程若發(fā)現(xiàn)壓力非常高,則可能管路已堵,應(yīng)先卸下色譜柱,然后用分段排除法檢查,確定何處堵塞后解決。若是保護(hù)柱或色譜柱堵塞,可用小流量流動相或以小流量異丙醇沖洗,還可采用小流量反沖的辦法(新柱不提倡),若還是無法通暢,則需換柱;
4、運(yùn)行過程中自動停泵,可能為壓力超過上限或流動相用完;
5、樣品瓶中樣品較少,自動進(jìn)樣器進(jìn)樣針無法到達(dá)液面,可采用調(diào)低進(jìn)樣針進(jìn)樣高度的辦法,注意設(shè)置時不要使進(jìn)樣針碰到瓶底,微量樣品分析應(yīng)使用微量樣品瓶;
6、自動進(jìn)樣器進(jìn)樣針未與樣品瓶瓶口對準(zhǔn)時,需重新定位。
7、泵壓不穩(wěn)或流量不準(zhǔn),可能為柱塞桿密封圈問題或seal wash墊圈問題,需更換;
8、基線產(chǎn)生不規(guī)則噪聲,可能原因為系統(tǒng)不穩(wěn)定或沒達(dá)到化學(xué)平衡(使其平衡,若用離子對試劑,在使用使需要足夠的時間和溶劑體積,色譜柱才能達(dá)到足夠的平衡),流動相被污染(更換流動相,清洗儲液器、過濾器,沖洗并重新平衡系統(tǒng)),色譜柱被污染(為證明可能的原因更換系統(tǒng)的色譜柱或使用一根同類的被證明性能好的色譜柱),檢測器不穩(wěn)定;
9、短期有規(guī)則的噪聲,可能原因為泵壓不穩(wěn)或泵脈沖,調(diào)節(jié)溶劑不適當(dāng)(如兩種溶劑的互溶性問題),泵入口管路松或堵塞,泵太臟,泵柱塞磨損,檢測器不穩(wěn)定;
10、長期有規(guī)則噪聲,可能原因為室溫不穩(wěn)(未使用柱溫箱)或使用柱溫箱不當(dāng);