液相色譜儀可從制備純化過程中進(jìn)行自動(dòng)識(shí)別色譜尺寸和類型,提高制備實(shí)驗(yàn)效率,無論是在提純合成化合物、天然產(chǎn)品、肽或聚合物。直觀的PeakTrak軟件可在數(shù)秒內(nèi)開始分離。根據(jù)要純化的樣品的類型和數(shù)量選擇正相或反相柱,允許RFID標(biāo)簽載入運(yùn)行參數(shù),確認(rèn)檢測器設(shè)置(UV,Vis,ELS和MS),按下開始,載入樣品,即可開始自動(dòng)工作,無需人員值守。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)隨時(shí)更改參數(shù),當(dāng)分離實(shí)驗(yàn)開始時(shí),依然可以修改參數(shù),包括溶劑百分比、波長、流速和運(yùn)行時(shí)間等,不需要進(jìn)行重復(fù)分離。
液相色譜儀的原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進(jìn)行分離的。使用外力使含有樣品的流動(dòng)相(氣體、液體)通過一固 定于柱中或平板上、與流動(dòng)相互不相溶的固定相表面。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。
為了保證液相色譜儀使用的穩(wěn)定性,我們對(duì)于設(shè)備使用環(huán)境是有一定要求的,包括:通風(fēng)、照明、供電、環(huán)境溫度和濕度以及潔凈度,其中:
1、通風(fēng):使用液相色譜儀分析過程中,由于流動(dòng)相中含有揮發(fā)性有機(jī)溶劑(甲醇、乙睛等)會(huì)產(chǎn)生有害氣體,對(duì)儀器中的光學(xué)元件帶來腐蝕,應(yīng)注意儀器室的通風(fēng),以排除室內(nèi)有害氣體、保持空氣清新。通風(fēng)主要有兩種方式:一種自然通風(fēng),定時(shí)打開門窗,讓內(nèi)外空氣對(duì)流;另一種是強(qiáng)制通風(fēng),如用通風(fēng)柜、排風(fēng)扇等,及時(shí)將有害氣體排出室外。
2、照明:室內(nèi)照明要光線適中,避免陽光直射。為避開直射光線對(duì)儀器操作、觀測的影響,儀器(顯示屏)應(yīng)側(cè)向光線。實(shí)驗(yàn)室窗戶要掛窗簾,以便隨時(shí)調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度。
3、供電:液相色譜室應(yīng)設(shè)有照明電源和動(dòng)力電源,動(dòng)力電可供儀器運(yùn)行使用。為減少噪音的干擾,儀器應(yīng)遠(yuǎn)離瞬時(shí)供電的大功率電器設(shè)備,如大型電動(dòng)設(shè)備、電梯、空調(diào)系統(tǒng)等。為保證HPLC輸液泵的精度,必須要保證穩(wěn)定的輸人電壓,為此,建議色譜室應(yīng)設(shè)有和儀器負(fù)荷相當(dāng)?shù)姆€(wěn)壓電源。
4、環(huán)境溫度和濕度:適宜的溫度和濕度是保障HPLC儀正常運(yùn)行、性能穩(wěn)定的必要條件。一般要求室溫在20一30℃之間,日溫度變化2一3℃,不要波動(dòng)太大,否則,在開機(jī)分析時(shí)會(huì)影響色譜分離,夏季一定要控制室溫不要超過30℃,溫度太高會(huì)使流路系統(tǒng)產(chǎn)生氣泡,影響檢測器的正常工作(如熒光檢測器)。室內(nèi)相對(duì)濕度應(yīng)控制在60%以下。
5、潔凈度:懸浮于空氣中的顆粒物質(zhì)會(huì)對(duì)色譜儀器分析帶來干擾,使本底和噪聲升高,成為分析測試的污染源,直接影響高純物質(zhì)的純度與痕量雜質(zhì)的分析。