空心膠囊多由藥用明膠加輔料精制而成的帽、體兩節(jié)膠囊殼組成，主要用于盛裝固體顆粒藥物。如自制散劑、保健品、藥劑等，為服用者解決了難入口、口感差的問(wèn)題，真正實(shí)現(xiàn)了良藥不再苦口。

為了區(qū)分方便、外表美觀、達(dá)到避光等要求，常見(jiàn)空心膠囊多是添加了各種色素，做成五顏六色的。但膠囊中使用的色素多為人工合成色素，過(guò)量攝入會(huì)對(duì)身體造成一定的損傷。我國(guó)目前雖暫時(shí)沒(méi)有統(tǒng)一的法規(guī)來(lái)規(guī)范空心膠囊中色素的使用，但隨著國(guó)家和百姓對(duì)藥品安全的日益重視，相關(guān)法規(guī)必將會(huì)逐漸頒布實(shí)施，膠囊中色素的檢測(cè)必將會(huì)成為膠囊生產(chǎn)企業(yè)的重要檢測(cè)項(xiàng)目之一。  

依利特公司結(jié)合2015版藥典及文獻(xiàn)資料，對(duì)膠囊中色素檢測(cè)方法進(jìn)行了摸索和優(yōu)化，推出膠囊中色素檢測(cè)HPLC解決方案，供相關(guān)行業(yè)工作人員參考使用。

儀器與試劑

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中其它玻璃器皿還包括容量瓶(10mL)、移液槍(0～1000µL)、移液槍槍頭(1mL)、一次性PVC手套、一次性口罩、進(jìn)樣針等若干。

實(shí)驗(yàn)方法

A 溶液配制

乙酸銨溶液(0.02mol/L)：稱取1.54g乙酸銨，加水至1000mL，溶解，經(jīng)0.45μm 微孔濾膜過(guò)濾。

氨水溶液：量取氨水2mL，加水至100mL，混勻。

甲醇-甲酸溶液(6+4，體積比)：量取甲醇60mL，甲酸40mL，混勻。

檸檬酸溶液：稱取20g檸檬酸，加水至100mL，溶解混勻。

無(wú)水乙醇-氨水-水溶液(7+2+1,體積比)：量取無(wú)水乙醇70mL、氨水溶液20mL、水10mL，混勻。

pH為6的水：水加檸檬酸溶液調(diào)pH到6。

pH為4的水：水加檸檬酸溶液調(diào)pH到4。

混合對(duì)照品溶液：分別稱取檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、youhuo紅、赤蘚紅、酸性紅、喹啉黃各5mg于10mL的容量瓶中，加水溶解，配制0.5mg/mL的混標(biāo)溶液，取上述混標(biāo)溶液1mL，加水稀釋10倍，經(jīng)0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾配制成每毫升相當(dāng)于50.0μg的合成著色劑。

B 樣品前處理

1、 稱取0.5g膠囊外殼加入10mL水，再加入200g/L檸檬酸調(diào)節(jié)pH值為6.0，于60℃水浴中放置5min；

2、 將2g聚酰胺粉中加入10mL水(pH=4)調(diào)成粥狀，倒入樣品溶液中，攪拌片刻，以G3垂熔漏斗抽濾，用60℃水(pH=4)洗滌3次，每次10mL；

3、 然后用甲醇-甲酸（6:4）的混合溶液10mL、5mL、5mL洗滌3次，再用水洗滌至中性；

4、 用乙醇-氨水-水（7:2:1）混合溶液解吸洗滌3次，每次5mL，洗至無(wú)色；

5、 收集解吸液，蒸發(fā)至近干，加水溶解并定容至10mL，經(jīng)0.45µL微孔濾膜濾過(guò)。

C 色譜條件

色譜柱：

Supersil ODS-B 5µm I.D.4.6×250mm

流動(dòng)相：

A-20mmol/L乙酸銨溶液，B-甲醇；梯度洗脫

流量：1.0 mL/min              

進(jìn)樣體積：10 μL

檢測(cè)波長(zhǎng)：UV254nm          

柱溫：35

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

將樣品提取液和合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用液分別注入液相色譜儀,根據(jù)保留時(shí)間定性,外標(biāo)峰面積法定量。

參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.35-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中合成著色劑的測(cè)定；

[2]《中國(guó)藥典》2015版。