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產品描述
PikoGreen是一種極為靈敏的雙鏈DNA熒光染料，僅與DNA雙鏈結合后才發(fā)出熒光，且所產生的熒光與DNA濃度呈正比，在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下，可以選擇性地檢測低至25 pg/mL的dsDNA。與傳統(tǒng)DNA定量方法相比，具有如下優(yōu)點：
靈敏：數(shù)量級較UV吸光讀數(shù)更敏感，可節(jié)省樣品。
特異性強：只結合dsDNA，特異性強，不受樣品常規(guī)污染影響。傳統(tǒng)紫外吸光法容易受樣品中存在的單鏈DNA，蛋白，RNA等影響。
耐受性好：耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖，可以直接定量PCR擴增產物而無需從反應混合物中純化DNA。
線性范圍寬：PikoGreen dsDNA染料測定DNA濃度，在100 pg/mL~100 ng/mL范圍內呈良好線性。
方便操作：在樣品中加入染料，染色5~6 min，然后讀數(shù)即可，且適用于96和384孔板。與大多數(shù)基于熒光的酶標儀兼容。
本產品可適用于各種DNA樣品分析、PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領域。
訂購信息
| 產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
| PikoGreen dsDNA定量試劑盒（Broad Range） | AN54L017 | 200 assay |
| PikoGreen dsDNA定量試劑盒（Broad Range） | AN54L018 | 1000 assay |
產品組分
| 組分 | AN54L017（200 assay） | AN54L018（1000assay） |
| A：1×定量緩沖液 | 50 mL | 250 mL |
| B：Piko Green Dye 100 × in DMSO反應液 | 0.5 mL | 2.5 mL |
| C：100×反應增強液 | 0.5 mL | 2.5 mL |
| D： dsDNA 標準品9 x 0.5 mL（0 , 2, 6.25, 12.5 , 25, 50 , 100, 150 and 200 ng/μL） | 9管（每管0.1 mL） | 9管（每管0.5 mL） |
保存方法
冰袋運輸，4℃避光干燥保存，保質期36個月。如果較長時間不用，建議把組分C與組分D放置于-20℃保存。
使用方法
（以96孔板為例）
1．使用前，將產品從儲存條件下取出恢復至室溫。PikoGreen提供的是DMSO溶液，在4℃存放時成固體，可37℃水浴溶解。每個組分應充分震蕩或渦旋混勻、離心，以免造成不必要的試劑損耗。
2．分別吸取19.6 mL組分A， 200 μL組分B， 200 μL組分C配制成20 mL1×PikoGreen工作液。新配工作液應在1 h內使用，工作液存放重新使用時須重懸，以免染料沉淀，工作液存放24 h，會輕微影響定量結果。
3．每個樣品，吸取200 μL 的工作液至黑色的96孔板微孔中。為確保結果精確可靠，建議每個測試樣品和DNA標樣分別做平行的3個復孔。
黑色的檢測板可以減少各測試樣品間的熒光干擾。
4．96孔板微孔中，分別加入dsDNA標樣或待測樣品各10 μL，并用移液器輕輕混勻。
5．將微孔板室溫避光孵育10分鐘，在Ex(nm)：350, Em(nm)：460處用酶標儀測量熒光值。
6．制作標準曲線，計算樣品濃度。
注意事項
1.為了得到最佳結果，請使用精確校準的移液器和去RNA酶的槍頭、試管以及檢測板。
2. 建議檢測時每個DNA標樣和未知樣品都設定3個復孔。如果檢測時不只一塊96孔板，建議每塊96孔板都設定一條標準曲線，盡量減少檢測板之間的誤差。
3. 為得到最佳結果，檢測板應在一小時內讀取完畢。如果將反應液重新儲存并在24 h內讀取數(shù)據(jù)，結果的精確性會有輕微損失。
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