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液相色譜流動(dòng)相溶劑如何選擇
流動(dòng)相在液相色譜中扮演的角色
目標(biāo)化合物在液相色譜中的保留取決于該物質(zhì)與流動(dòng)相和固定相間的作用強(qiáng)度。流動(dòng)相是整個(gè)液相色譜分離過(guò)程中的“血液"，它對(duì)組分有親和力，并參與固定相對(duì)組分的競(jìng)爭(zhēng)，因此流動(dòng)相的選擇直接影響組分的分離度。
流動(dòng)相選擇原則
1
適用性
用作流動(dòng)相的溶劑應(yīng)與固定相不相溶，并能保持色譜柱的穩(wěn)定性。
2
純度
流動(dòng)相所用溶劑應(yīng)有高純度，以防流動(dòng)相中的雜質(zhì)在色譜柱上積累，致使柱性能下降。
3
檢測(cè)背景值
譬如使用紫外檢測(cè)器時(shí)，所用流動(dòng)相在檢測(cè)波長(zhǎng)下應(yīng)沒(méi)有吸收或吸收很??；當(dāng)使用示差檢測(cè)器時(shí)，應(yīng)選擇折射率與樣品差別較大的溶劑作為流動(dòng)相。
4
粘度與沸點(diǎn)
溶劑的粘度和沸點(diǎn)要適當(dāng)。
使用低粘度溶劑可以減少溶質(zhì)的傳質(zhì)阻力，有利于提高柱效，但如yi醚等溶劑也不宜使用，因?yàn)檎扯冗^(guò)低的溶劑容易在色譜柱或檢測(cè)器內(nèi)形成氣泡，影響分離。而粘度高溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì)，降低柱效，還會(huì)使柱壓升高，分離時(shí)間延長(zhǎng)。
對(duì)于制備和純化樣品所用的流動(dòng)相最好選用沸點(diǎn)較低的溶劑，這樣易用蒸餾等方法把溶劑從柱后收集液中去除，有利于樣品的純化。
5
對(duì)樣品的溶解度
如果流動(dòng)相對(duì)樣品的溶解度較差，樣品會(huì)在色譜柱柱頭沉積，導(dǎo)致柱效下降。
6
毒性
應(yīng)盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑，減少環(huán)境污染和確保實(shí)驗(yàn)人員的安全。
常用的流動(dòng)相
反相色譜是大多數(shù)樣品分析的shou選分離模式，該模式一般比其他液相色譜模式的普適性更好、更方便、更容易獲得令人滿意的分離效果。在反相色譜中，一般使用非極性/弱極性鍵合固定相色譜柱，如C18柱、苯基柱等。
流動(dòng)相的選擇通常以水相（包括加入一定量的酸、堿、無(wú)機(jī)鹽緩沖液等）做基礎(chǔ)溶劑，再加入一定量的能與水互溶的如甲醇（質(zhì)子給體）、乙腈（質(zhì)子受體）、四氫呋喃（偶極溶劑）等極性溶劑，其極性及其K值（分配系數(shù)）和分離選擇性有顯著影響。下表列出一些常用溶劑的極性參數(shù)p’。
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