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實(shí)驗(yàn)技巧 | 揮發(fā)性或粘度高的試劑，流動(dòng)相配置需注意
流動(dòng)相是高效液相檢測(cè)中非常重要的一個(gè)環(huán)節(jié)，其操作的合規(guī)性和準(zhǔn)確性直接影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性。在日常檢測(cè)中，我們經(jīng)常會(huì)遇到流動(dòng)相含有揮發(fā)性試劑（如三氟yi酸（TFA）、三乙胺、濃氨等）的情況；也會(huì)遇到含粘度較高的組分（如磷酸等）。這些組分在流動(dòng)相配置時(shí)，其添加方法需要特別注意，以免因試劑揮發(fā)或放液不wan全而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
三乙胺是液相流動(dòng)相中常用的一種組分，起到調(diào)節(jié)pH，屏蔽固定相上的硅羥基從而修飾峰形，改善峰拖尾等作用。同時(shí)它也是一種揮發(fā)性試劑，如按常規(guī)方法，在液面以上放液，就會(huì)出現(xiàn)因三乙胺揮發(fā)導(dǎo)致的流動(dòng)相配置不準(zhǔn)確的情況，因此在添加三乙胺等揮發(fā)性試劑時(shí)，建議選用量入式移液管，伸至液面以下再放液。
示例
某項(xiàng)目，流動(dòng)相為：15mmol/L磷酸二氫鉀溶液（含0.06%三乙胺和0.14%磷酸）
流動(dòng)相配置一：常規(guī)配置方法，三乙胺在液面以上放液，配置流動(dòng)相。
通過以上兩圖對(duì)比可發(fā)現(xiàn)，不同的流動(dòng)相配置操作，會(huì)導(dǎo)致出峰時(shí)間的明顯變化。
結(jié)論
配置流動(dòng)相時(shí)，要按不同試劑的特性選擇合適的配制方法，不能一概而論。
1）對(duì)于揮發(fā)性試劑，如三乙胺，二乙胺，三氟yi酸，七氟丁酸等，添加時(shí)，為避免揮發(fā)導(dǎo)致濃度差異，配置時(shí)將移液管插入到液面以下再放液。
2）對(duì)于粘稠試劑，如磷酸，量取時(shí)要盡量慢，吸取完畢后用紙巾擦拭管口周圍，避免試劑附著在管口，影響添加試劑的濃度。添加時(shí)，要注意放緩放液速度，以避免因放液過快，部分試劑還附著在移液管壁沒有流下，導(dǎo)致流動(dòng)相的濃度差異。