細(xì)胞名稱： Caco-2 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
貼壁，上皮樣細(xì)胞
編號： 350769
產(chǎn)品形式： 2mL 凍存管× 2 支、或T25 × 1 瓶；
安全等級： 一級，安全柜或超凈臺操作
收貨須知：收貨當(dāng)天發(fā)現(xiàn)異常，請在24 小時內(nèi)及時聯(lián)系客服，逾期視為收貨良好；凍存管形式，收貨后及時置于-80℃冰箱保存，若長時間不使用，應(yīng)過夜轉(zhuǎn)移至液氮保藏；T25 形式，收貨后先培養(yǎng)瓶原裝置于培養(yǎng)箱靜養(yǎng)4h，然后再對細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)操作。復(fù)蘇時每管一次用完不得留存，復(fù)蘇后傳一代，即可正常使用。請嚴(yán)格按照本說明操作，否則造成細(xì)胞失活等情形，不予提供補發(fā)服務(wù)。
培養(yǎng)條件：37℃，5%CO2，CM1-1 培養(yǎng)液。CM1-1 培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM 高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。
復(fù)蘇步驟：①新制100mm 平皿1 個，含12mL 上述培養(yǎng)液；②凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴1~2min,待*溶解后盡快移入安全柜復(fù)蘇；③用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時針搖勻；④放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中，過夜換液，2-4 天長滿。
傳代/凍存：將舊培養(yǎng)液吸除，PBS 清洗兩遍后，加入6mL（/100mm 皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約5min 取出。傳代用12mL CM1-1 培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6 皿培養(yǎng)；凍存則用6mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6 支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。
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