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技術(shù)文章

美國Corning(康寧)細(xì)胞計數(shù)儀常見問題

閱讀:1985          發(fā)布時間:2021-4-21

經(jīng)常會有小伙伴在后臺或致電400熱線來咨詢康寧生命科學(xué)的產(chǎn)品或使用方法。為了更有效地幫助大家了解我們的產(chǎn)品、改善產(chǎn)品選擇流程,同時解決可能出現(xiàn)的問題,我們技術(shù)部小姐姐特地針對咨詢和疑問較多的產(chǎn)品,整理了一系列常見問題解答。

康寧細(xì)胞計數(shù)儀(貨號為6749)可計數(shù)的細(xì)胞大小和濃度范圍是多少?

可計數(shù)的細(xì)胞大小范圍為4~70 μm,細(xì)胞濃度范圍為5 x 104~1.0 x 107細(xì)胞/mL。

康寧細(xì)胞計數(shù)儀能否對活細(xì)胞和死細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分?

可以。通過細(xì)胞懸液與臺盼藍(lán)1:1混合,臺盼藍(lán)會將死細(xì)胞染成深藍(lán)色,而活細(xì)胞則不被臺盼藍(lán)染色。將混合液加入計數(shù)板中計數(shù)時,在軟件頁面選擇“trypanblue, yes (1:1)”, 計數(shù)儀會自動分析死活細(xì)胞的數(shù)量及比例,并將結(jié)果直接展示在結(jié)果區(qū),該結(jié)果無需再乘以2。

康寧細(xì)胞計數(shù)儀能否對細(xì)胞團(tuán)簇進(jìn)行區(qū)分并準(zhǔn)確計數(shù)?

可以分析含有細(xì)胞簇的樣品。以下是對于293T細(xì)胞計數(shù)的測試圖片供您參考,兩圖中紅圈圈出部分是細(xì)胞團(tuán)簇,右圖中綠點(diǎn)代表檢測到的活細(xì)胞,紅點(diǎn)代表識別的死細(xì)胞。

計數(shù)時,視野中心細(xì)胞清晰,而邊緣細(xì)胞對焦不清晰,尤其是小于10um的細(xì)胞,是否會影響計數(shù)結(jié)果?

由于計數(shù)儀鏡頭是球形的,在對焦準(zhǔn)確時,即使邊緣的對焦不是很清晰,儀器仍然會對視野中計數(shù)范圍內(nèi)(4-70 μm)的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)。若您對計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性有較高的要求,建議您拍攝多張圖片進(jìn)行計數(shù),軟件可以將多張圖片中的結(jié)果整合取平均數(shù),以提高計數(shù)準(zhǔn)確性。 

如何更好地對焦, 從而確保計數(shù)準(zhǔn)確?

為了準(zhǔn)確地計數(shù)分析,需要確保對焦準(zhǔn)確。通過聚焦旋鈕多次順時針或逆時針旋轉(zhuǎn),并且可以進(jìn)一步放大圖像觀察,能夠看到活細(xì)胞有明亮的中心和清晰的邊緣,如下圖所示,左側(cè)圖為未成功對焦,而右側(cè)圖中對焦準(zhǔn)確:

康寧細(xì)胞計數(shù)儀能否對外周血單核細(xì)胞(PBMC)進(jìn)行計數(shù)?

可以。PBMC細(xì)胞大小約7-8 μm,符合康寧細(xì)胞計數(shù)儀的計數(shù)范圍。在對PBMC計數(shù)時,需要注意避免碎片等非細(xì)胞雜質(zhì)被識別成死細(xì)胞從而影響結(jié)果,因此準(zhǔn)確對焦非常重要。死細(xì)胞在對準(zhǔn)焦后呈現(xiàn)出實心黑點(diǎn)的樣子,如下圖所示,盡可能避免對焦后有光環(huán)或模糊狀的存在。

 

 

康寧細(xì)胞計數(shù)儀采用云端平臺,云端賬號和數(shù)據(jù)是否安全可靠?

康寧細(xì)胞計數(shù)儀使用微軟Azure云平臺,符合一系列廣泛的國際和行業(yè)特定的合規(guī)標(biāo)準(zhǔn),通過嚴(yán)格的第三方審計,是安全可靠的網(wǎng)絡(luò)云端平臺??蛻粢部梢詫?dǎo)出數(shù)據(jù)自行保存到本地之后,刪除云端數(shù)據(jù)。

康寧細(xì)胞計數(shù)儀能夠快速計數(shù)只需3秒,為什么我計數(shù)所需時間更長,不止3秒?

康寧細(xì)胞計數(shù)儀的特點(diǎn)是快速、準(zhǔn)確,計數(shù)只需要3秒。需要注意的是,康寧細(xì)胞計數(shù)儀采用CytoSMART™云計算應(yīng)用軟件,通過Microsoft Azure云端計算平臺進(jìn)行圖像處理,所以對于網(wǎng)絡(luò)有一定的要求,無論是無線網(wǎng)絡(luò)還是有線網(wǎng)絡(luò),只有網(wǎng)絡(luò)下載速度為70Mbps,上傳速度為20 Mbps時,計數(shù)時間才能達(dá)到3秒。細(xì)胞計數(shù)時間會隨著網(wǎng)絡(luò)速度的不同而有所差異。此外,若客戶上傳多張照片同時對同一樣品進(jìn)行計數(shù),計數(shù)時間也會隨之延長。

一定需要匹配Windows 10系統(tǒng)嗎?可否兼容Windows 7或者M(jìn)ac系統(tǒng)?

康寧細(xì)胞計數(shù)儀默認(rèn)匹配Windows 10系統(tǒng),與Mac系統(tǒng)不兼容。不建議使用Windows 7系統(tǒng),由于配置不同,可能會影響計數(shù)速度。

康寧細(xì)胞計數(shù)儀數(shù)據(jù)/圖片導(dǎo)出格式有哪些?

數(shù)據(jù)導(dǎo)出可以有Excel表格和Pdf文檔兩種格式;圖片導(dǎo)出有PNG和SVG 兩種格式。

計數(shù)儀中有配套計數(shù)板嗎?除了康寧配套的計數(shù)板,是否還可以適配其他的計數(shù)板呢?

購買康寧計數(shù)儀配套帶有一塊血球計數(shù)板(貨號為 480200)和兩片蓋玻片,可以重復(fù)使用,也可以額外單獨(dú)購買。對蓋玻片的要求是厚度為0.1mm。此外,市面上大多數(shù)的玻璃和塑料細(xì)胞計數(shù)板也可適用于該儀器,但請您在采購前少量測試其他廠商的計數(shù)板產(chǎn)品在該儀器上的計數(shù)表現(xiàn)。

康寧細(xì)胞計數(shù)儀在運(yùn)行中出現(xiàn)故障時,我應(yīng)該如何報修?

若儀器出現(xiàn)故障,請先排查電腦和網(wǎng)絡(luò)是否正常運(yùn)行,儀器與電腦之間的連接是否異常。您可以從以下路徑獲取儀器運(yùn)行記錄文件

文件名:logfile.txt

路徑:

C:\ProgramData\CytoSmartExactNew\logging

*需勾選顯示隱藏文件夾

如果您排查了電腦和網(wǎng)絡(luò)依然不能解決細(xì)胞計數(shù)儀的故障,請您聯(lián)系向您出售儀器的經(jīng)銷商,以確認(rèn)該產(chǎn)品是否在一年質(zhì)保期內(nèi)(以您的發(fā)票時間為準(zhǔn)進(jìn)行核算)。質(zhì)保期內(nèi)的產(chǎn)品會由經(jīng)銷商寄往我司小儀器授權(quán)維修中心檢查,確認(rèn)問題后會為您更換一臺新的細(xì)胞計數(shù)儀。質(zhì)保期外或是人為原因造成的故障可由您決定是否進(jìn)行付費(fèi)維修。

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