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一． 細(xì)胞特性
細(xì)胞名稱： 143B細(xì)胞，人骨肉瘤細(xì)胞
生長特性：貼壁 上皮細(xì)胞樣
種 屬：人
貨期（工作日）：5—7
培養(yǎng)難度：★★
二． 培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：90%DMEM(H)+10%FBS
溫度：37℃ 氣相：95%空氣,5% CO2
三． 傳代方式
1.用75%酒精噴灑整個(gè)培養(yǎng)瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行1-3小時(shí)的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液以及傳代，一般2到3天換一次液；
2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%-90%，需要對其進(jìn)行傳代，傳代比例為1:3到1:6；
3傳代步驟：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預(yù)熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預(yù)熱好的胰酶，置于37°孵育消化（第d一次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為d佳消化時(shí)間，記錄d佳消化時(shí)間，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后收集細(xì)胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行傳代。
四． 凍存條件
凍存條件：80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO
(*建議使用本公司無血清細(xì)胞冷凍液（H-W-100），用4度保存的冷凍液重懸細(xì)胞，直接凍存于-80°C。)
長期存儲：液氮
五． 供應(yīng)限制
該產(chǎn)品僅供研究使用。
發(fā)貨方式
我們采取兩種形式的細(xì)胞發(fā)貨方式：
1. 復(fù)蘇發(fā)貨
a. T25瓶活細(xì)胞發(fā)貨
b. 血清重懸發(fā)貨
2. 凍存管發(fā)貨(干冰發(fā)貨)
對于采取凍存管方式發(fā)貨的客戶，為了保證可靠性我們會多發(fā)一管細(xì)胞(共2管)，干冰覆蓋保溫運(yùn)輸。
復(fù)蘇及凍存發(fā)貨方式均為順豐速運(yùn)，我們會根據(jù)收貨地址及溫度差異采取不同的發(fā)貨方式(T25/血清重懸/凍存/用戶)，并在發(fā)貨前的3天內(nèi)與您確認(rèn)收貨地址及配送方式。
歡迎江浙滬地區(qū)的客戶到實(shí)驗(yàn)室上門自?。▓?bào)銷路費(fèi)）。
