在使用熒光顯微鏡時有哪些注意事項呢？

閱讀：1495發(fā)布時間：2022-5-7

　　熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光;

　　另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。

　　下面讓我們一起來了解一下熒光顯微鏡的使用注意事項吧

　　(1)嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作，不要隨意改變程序。

　　(2)應(yīng)在暗室中進行檢查。進入暗室后，接上電源，點燃超高壓汞燈5~15min，待光源發(fā)出強光穩(wěn)定后，眼睛*適應(yīng)暗室，再開始觀察標本。

　　(3)防止紫外線對眼睛的損害，在調(diào)整光源時應(yīng)戴上防護眼鏡。

　　(4)檢查時間每次以1~2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降，熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后，熒光也明顯減弱;所以，最多不得超過2~3h。

　　(5)熒光顯微鏡光源壽命有限，標本應(yīng)集中檢查，以節(jié)省時間，保護光源。天熱時，應(yīng)加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時，須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點燃光源。

　　(6)標本染色后立即觀察，因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時間，防止封裱劑蒸發(fā)。長時間的激發(fā)光照射標本，會使得熒光衰減和消失現(xiàn)象，故應(yīng)盡可能縮短照射時間。暫時不觀察時可用擋光板遮蓋激發(fā)光。

　　(7)標本觀察時候應(yīng)采用無熒光油，應(yīng)避免眼睛直視紫外光源。

　　(8)電源應(yīng)安裝穩(wěn)壓器，電壓不穩(wěn)會降低熒光燈的壽命。

　　熒光顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別

　　熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別:

　　1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上;

　　2.光源為紫外光，波長較短，分辨力高于普通顯微鏡;

　　3.有兩個特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護人目。

　　熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種，主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。

　　熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長的光激發(fā)標本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標本的熒光圖像。

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