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尺寸排阻色譜柱的清洗流程
閱讀：3346 發(fā)布時(shí)間：2018-3-22尺寸排阻色譜柱包括分子量測(cè)定范圍不同的5種規(guī)格的色譜柱，可以將適合樣品分子量和分子量分布的不同級(jí)別的色譜柱串聯(lián)起來(lái)進(jìn)行分析。尺寸排阻色譜柱通過(guò)優(yōu)化填料的粒徑和細(xì)孔容積，實(shí)現(xiàn)了色譜柱性能的提升，和色譜柱操作壓強(qiáng)的降低。特別是對(duì)單克隆抗體三聚體/二聚體/單體的分離性能有很大的提高，對(duì)單體/片段也有很好的分離效果。
尺寸排阻色譜柱為了方便根據(jù)待測(cè)成分的分子量來(lái)選擇合適的色譜柱，按照凝膠表面孔的大小分成了很多種類。各種色譜柱的排阻界限分子量在產(chǎn)品目錄上都有詳細(xì)記錄，使用的時(shí)候要按照待測(cè)樣品zui大分子量不超過(guò)尺寸排阻色譜柱的排除界限分子量的規(guī)則來(lái)進(jìn)行選擇。另外，在不超過(guò)排除界限分子量的前提下，盡量選擇排除界限分子量小的色譜柱比較合適。
尺寸排阻色譜柱一般清洗流程如下：
1. 將色譜柱與檢測(cè)器斷開(kāi)；
2. 將色譜柱反接后進(jìn)行沖洗；
3. 在低于50%zui大推薦流速的條件下沖洗色譜柱。注意柱壓的變化。如果柱壓超出正常水平許多，可降低流速或更換低粘度的緩沖液作為沖洗溶劑；
4. 一般用清洗溶液沖洗10-15倍柱體積即可。更換溶液時(shí)請(qǐng)用3-5倍柱體積的經(jīng)蒸餾的去離子水將尺寸排阻色譜柱沖洗干凈。
尺寸排阻色譜柱為外來(lái)體分離和純化:
尺寸排阻色譜柱包含具有約75納米的孔隙尺寸的樹(shù)脂。蛋白質(zhì)和其他污染分子比外來(lái)體小進(jìn)入的樹(shù)脂的孔，并在通過(guò)該柱的通道被延遲，在以后的級(jí)分洗脫。當(dāng)與TRPS測(cè)量結(jié)合使用QEV列導(dǎo)致更高質(zhì)量的外來(lái)體的測(cè)量和分析。