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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0926圖片

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品       牌ATCC

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-01-05 10:26:13瀏覽次數(shù):597次

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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0926圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0926圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0926圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系來(lái)源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法  1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

小鼠腸動(dòng)脈內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Ampicillin(100mg/ml,1000X)規(guī)格:5*1ml
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
M-FC瓊脂/濾膜糞大腸菌瓊脂/M-FC Agar大腸桿菌群的濾膜法檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人淋巴血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大腸菌群顯色培養(yǎng)基/Coliform Chromogenic Medium快速準(zhǔn)確檢測(cè)大腸菌群,大腸菌群培養(yǎng)24小時(shí),顯蘭色1升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
貓腎上細(xì)胞英文名稱:CRFK
酪蛋白瓊脂/水解酪蛋白瓊脂/Casein Agar Medium用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎管狀上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
糖蛋白胨培養(yǎng)液/糖蛋白胨肉湯/Lactose Peptone Broth飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
乙基紫疊氮鈉肉湯/EVA肉湯/EVA Broth用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
RN-c, 大鼠質(zhì)神經(jīng)元
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL抑肽素 APepstatin A
AP106AP106
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDaDiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDa
15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2 Lipid Maps MS Standard (5 mg)15-deoxy-Δ12,14-PGJ2, 15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2 Lipid Maps MS Standard, 11-oxo-prosta-5Z,9,12E,14Z-tetraen-1-oic acid
8-iso-15-keto Prostaglandin F2β (5 mg)8-iso-15-keto Prostaglandin F2β, 9.beta.,11.alpha.-dihydroxy-15-oxo-(8.beta.)-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
15-S)-HETE Ethanolamide (500 ug)15(S)-HAEA, 15-S)-HETE Ethanolamide, 15(S)-hydroxy-N-(2-hydroxyethyl)-5Z,8Z,11Z,13E-eicosatetraenamide
MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite (5 mg)MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite, (1-(5-fluoro-4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(4-methylnaphthalen-1-yl)methanone
15-keto Latanoprost (100 mg)15-keto Latanoprost, 9.alpha.,11.alpha.-dihydroxy-15-oxo-17-phenyl-18,19,2-trinor-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester
D-myo-Inositol-1,3,4-triphosphate (sodium salt) (5 mg)Ins(1,3,4)-P3 (sodium salt)|1,3,4-IP3 (sodium salt), D-myo-Inositol-1,3,4-triphosphate, D-myo-inositol-1,3,4-tris(dihydrogen phosphate), trisodium salt
25I-NBOMe (hydrochloride) (5 mg)25I-NBOMe, 4-iodo-2,5-dimethoxy-N-[(2-methoxyphenyl)methyl]-benzeneethanamine, monohydrochloride
L-色氨酸(25GM)L-Tryptophan, CAS# 73-22-3; MW 204.23; USP
中國(guó)藍(lán)薔薇酸瓊脂250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Ca Ski(人宮頸上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

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