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tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6說明書

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌ATCC

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-11 10:03:28瀏覽次數(shù):390次

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tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6說明書采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6說明書現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書

產(chǎn)品名稱tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6說明書
用途僅用科研
保存條件4℃保存一年;-20℃長期保存

細胞名稱
形態(tài)特性  多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  轉(zhuǎn)染pCAG-tTA質(zhì)粒,經(jīng)2.0ug/ml puromycin篩選,為Tet-off穩(wěn)定調(diào)控細胞系,受強力霉素Dox調(diào)控倍數(shù)在20~50倍。細胞倍增時間為24小時。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  5%FBS + 2.0ug/ml puromycin
傳代方法  1:4傳代,2~3天傳代一次。
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。PB-22 RM (1 mg)QUPIC; 1-pentyl-8-quinolinyl ester-1H-indole-3-carboxylic acid
GNE 7915 (5 mg)[4-[[4-(ethylamino)-5-(trifluoromethyl)-2-pyrimidinyl]amino]-2-fluoro-5-methoxyphenyl]-4-morpholinyl-methanone
4-[[5-氨基-1-(2,6-二氟苯甲?;?1H-1,2,4-三唑-3-基]氨基]苯磺酰胺Aurora A Inhibitor I (5 mg)
生物素標記組蛋白H3多肽(氨基酸:1-21)Biotinylated Histone H3 Peptide (residues 1-21) (200 ul)
Ac-LEVD-AFC, Caspase-4熒光底物Caspase-4 Substrate LEVD-AFC
Ascotoxin, BFA, Cyanein, Decumbin, γ,4-Dihydroxy-2-(6-hydroxy-1-heptenyl)-4-cyclopentanecrotonic acid λ-lactoneBrefeldin A
GW-57201, Tykerb, TyverbLapatinib Ditosylate (Tykerb, Tyverb, GW-572016)
NSC-250682Oridonin
NP-40NP-40 (10% in H
Indole 3-propionamideIPAM
N-Salermide
5-[1,2-Dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene)methyl]-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3-propanoic acidSU 6668
Polyethylene glycol sorbitan monolaurate, Polyoxyethylenesorbitan monolaurateTween 20, MegaPure Detergent, 10% Solution
α-Toluenesulfonyl fluoride, Benzylsulfonyl fluoride, Phenylmethylsulfonyl fluoridePMSF
3-[(Decahydro-1α,2β,4aβ-trimethyl-5-methylene-1-naphthyl)methyl]-2-hydroxy-5-methoxybenzoquinone; IQIlimaquinone
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