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小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3價格

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌ATCC

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-13 09:52:34瀏覽次數(shù):266次

聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3價格售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3價格質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  NIH/3T3是從NIH Swiss小鼠胚胎培養(yǎng)物中建立的高度接觸性抑制的連續(xù)傳代細胞株。為了培育在形態(tài)學特征上更適合于進行轉(zhuǎn)化分析的亞株,建立的NIH/3T3細胞株又進行了5輪以上亞克隆。該細胞株對肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感,對DNA轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)染研究十分有用。鼠痘病毒陰性。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C84
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

Cycloheximide (1 g)4-[(2R)-2-[(1S,3S,5S)-3,5-dimethyl-2-oxocyclohexyl]-2-hydroxyethyl]-2,6-piperidinedione; Naramycin A|NSC 185; Cycloheximide
Memantine (hydrochloride) (100 mg)3,5-dimethyl-tricyclo[3。3。1。13,7]decan-1-amine, monohydrochloride; Akatinol|Axura|Ebix|NSC 102290|Namenda|SUN Y7017; Memantine (hydrochloride)
StemRegenin 1 (hydrochloride) (10 mg)4-(2-((2-(benzo[b]thiophen-3-yl)-9-isopropyl-9H-purin-6-yl)amino)ethyl)phenol, monohydrochloride; SR1; StemRegenin 1 (hydrochloride)
Spectinomycin (hydrochloride hydrate) (10 g)(5aR,9aR,10aS)-decahydro-4aR,7S,9S-trihydroxy-2R-methyl-6S,8R-bis(methylamino)-4H-pyrano[3-b][1,4]benzodioxin-4-one, dihydrochloride pentahydrate; Spectinomycin (hydrochloride hydrate)
JWH 398 N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5 (100 ug)(4-chloronaphthalen-1-yl)(1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5)methanone; JWH 398 N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5
Rifampicin (1 g)3-[[(4-methyl-1-piperazinyl)imino]methyl]-rifamycin; NIH 10782|NSC 113926|Rifampin; Rifampicin
Ac-DEVD-CMK (1 mg)N-acetyl-L-α-aspartyl-L-α-glutamyl-N-[(1S)-1-(carboxymethyl)-3-chloro-2-oxopropyl]-L-valinamide; Ac-Asp-Glu-Val-Asp-CMK|Caspase-3 Inhibitor III; Ac-DEVD-CMK
PB-22 5-hydroxyquinoline isomer (5 mg)quinolin-5-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate; PB-22 5-hydroxyquinoline isomer
PB-22 7-hydroxyisoquinoline isomer (1 mg)isoquinolin-7-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate; PB-22 7-hydroxyisoquinoline isomer
Acetyl * (hydrochloride) (10 mg)*[1-(2-phenylethyl)-4-piperidinyl]-acetamide, monohydrochloride; Desmethyl *|MCV 4848|NIH 10485; Acetyl * (hydrochloride)
CYM 50308 (1 mg)(2Z,5Z)-5-[[1-(2,4-difluorophenyl)-2,5-dimethyl-1H-pyrrol-3-yl]methylene]-2-[(2-methoxyethyl)imino]-3-methyl-4-thiazolidinone; CID-49835928|ML-248; CYM 50308131083-20天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒20 次
微型離心管研磨杵 ( 無離心管 ) 50 只
Hoechst33342 干粉10mg
5- 溴 -2'- 脫氧尿苷100mg
DMEM( 低糖 )10L
CAS69-89-6黃嘌呤1g
21-0070-5 骨骼肌細胞生長因子5mL
91102-50柱式骨骼 DNAout50 次
RecA 蛋白1000μg 
DEAE 瓊脂糖凝膠 6B25mL
96 孔板病毒 DNAout( 離心法 )5次
核酸內(nèi)切酶 III (Nth)1000U
CAS64431-96-51,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷5g
12-269KM71 酵母菌種1mL
一氧化氮檢測試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )25 T
克必隆 eTS cDNA 文庫構(gòu)建試劑盒1套
透明質(zhì)酸100mg
IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )500mL
DNA ,pH5.2,3M 100mL
131229-10一站式生物素 TUNEL 試劑盒 (FITC/POD)10 次
90602A-50DNA 電泳分子量標準 (3)λDNA/HindIII50 次
生物素化山羊抗親和素0.5mg

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