小鼠黑色素瘤細胞；B16-F1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠黑色素瘤細胞；B16-F1圖片
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  B16-F1是B16-F0的亞系。  
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C27
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

α-Piperidinobutiophenone （hydrochloride） （5 mg）1-phenyl-2-（1-piperidinyl）-1-butanone， monohydrochloride； α-Piperidinobutiophenone （hydrochloride）
Rasagiline （100 mg）（1R）-2，3-dihydro-N-2-propyn-1-yl-1H-inden-1-amine； Azilect ； Rasagiline
4-hydroxy Hexenal （10 mg）（±）-4-hydroxy-2E-hexenal； 4-HHE； 4-hydroxy Hexenal
MK 0524 （1 mg）Laropiprant； （3R）
Prostaglandin Screening Library II （96-Well） （50 ul）Prostaglandin Compound Screening Library 2
（±）-epi CP 47，497 （solution） （5 mg）rel-2[（1S，3S）-3-hydroxycyclohexyl）]-5-（2-methyloctan-2-yl）phenol； 3-trans CP 47，497； （±）-epi CP 47，497 （solution）
（±）17-HDoHE （25 ug）（±）17-hydroxy-4Z，7Z，10Z，13Z，15E，19Z-docosahexaenoic acid； 17-hydroxy Docosahexaenoic Acid； （±）17-HDoHE
（±）5，6-DHET lactone （25 ug）（±）5，6-dihydroxy-8Z，11Z，14Z-eicosatrienoic acid， 1，5-lactone； （±）5，6-DiHETrE lactone； （±）5，6-DHET lactone
Ketamine （hydrochloride） （10 mg）CI-581； 2-
（+）-Methamphetamine （hydrochloride） （50 mg）（+）-Methylamphetamine|NSC 169505|d-Desoxyephedrine|d-Methamphetamine； N,
2C-TFM （hydrochloride） （5 mg）2C-CF3； 2,5-dimethoxy-4-（trifluoromethyl）-benzeneethanamine, monohydrochloride
3-oxo Stearic Acid （100 ug）3-oxo Octadecanoic Acid|β-keto Stearic Acid； 3-oxo-octadecanoic acid
Zinquin ethyl ester （1 mg）2-[[2-methyl-8-[[（4-methylphenyl）sulfonyl]amino]-6-quinolinyl]oxy]-acetic acid, ethyl ester
AB-FUBINACA-d4 （1 mg）N-[（1S）-1-（aminocarbonyl）-2-methylpropyl]-1-[（4-fluorophenyl）methyl]-4,5,6,7-d4-1H-indazole-3-carboxamide
JIB-04 （10 mg）JHDM Inhibitor VII|NSC 693627； （E,E）-2-（5-chloro-2-pyridinyl）hydrazone phenyl-2-pyridinyl-methanone
Heat Shock Protein Inhibitor I （25 mg）HSP Inhibitor I|KNK 437； 3-（1,3-benzodioxol-5-ylmethylene）-2-oxo-1-pyrrolidinecarboxaldehyde
Lamotrigine （10 mg）BW 430C|Epilepax|LTG|Lamictal； 6-Cy3-dCTP 溶液，10mM25μL
CAS59-92-73-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸5g
12-255SURE 菌種1mL
一步法無內毒素質粒 DNAout50 次
姬姆色素染料1g
固藍 BB 鹽5g
辣根過氧化物酶，偶聯100mg
CAS133-32-4吲哚 -3- 丁酸1g
131006-100RIPA 裂解液 ( 強 )100mL
熒光素標記的生物素5mg
聚乙烯亞胺100mL
雙 (2- 羥乙基 ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷5g
UTP 溶液，2.5mM2mL
CAS9003-99-0辣根過氧化物酶10mg
131078-5天然蛋白 A1mg
柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒50 次
L-NAME(eNOS 抑制劑 )200mg
蘋果酸脫氫酶5ku
MTS 細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒500 次
CAS64285-73-03,3’,5,5’- 四甲基聯苯胺二鹽酸1g
130880-1脂蛋白 PAGE 染液1套
β- 氨基1g
M13mp18DNA10μg
吡啰紅 G5g
乳酸測試盒 ( 測全血 )48 T