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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1圖片

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品       牌ATCC

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-01-13 10:09:26瀏覽次數(shù):338次

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小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1圖片
形態(tài)特性  單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞來源于BABL/cN小鼠,有抗體依賴的吞噬作用,生長(zhǎng)受硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制;可產(chǎn)生IL-1β和大量的溶菌酶。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

PB-22 5-hydroxyquinoline isomer (10 mg)quinolin-5-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate; PB-22 5-hydroxyquinoline isomer
PB-22 6-hydroxyisoquinoline isomer (5 mg)isoquinolin-6-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate; PB-22 6-hydroxyisoquinoline isomer
7-dehydro Cholesterol (50 g)cholesta-5,7-dien-3β-ol; 7-DHC|NSC 18159|Provitamin D3|Δ7-Cholesterol; 7-dehydro Cholesterol
Zaltoprofen (500 mg)10,11-dihydro-a-methyl-10-oxo-dibenzo[b,f]thiepin-2-acetic acid; CN 100|Soleton; Zaltoprofen
25E-NBOMe (hydrochloride) (5 mg)2-(4-ethyl-2,5-dimethoxyphenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethan-1-amine, monohydrochloride; 2C-E-NBOMe; 25E-NBOMe (hydrochloride)
SU 9516 (1 mg)1,3-dihydro-3Z-(1H-imidazol-5-ylmethylene)-5-methoxy-2H-indol-2-one; SU 9516
Leflunomide (50 mg)5-methyl-N-[4-(trifluoromethyl)phenyl]-4-isoxazolecarboxamide; Arava|Avara|HW 486|SU 101; Leflunomide
Nitracaine (10 mg)3-(diethylamino)-2,2-dimethylpropyl 4-nitrobenzoate; Nitracaine
CTAP (1 mg)D-phenylalanyl-L-cysteinyl-L-tyrosyl-D-tryptophyl-L-arginyl-L-threonyl-3-mercapto-L-valyl-cyclic (2→7)-disulfide-L-threoninamide; CTAP
PF-04981517 (25 mg)1-methyl-3-[1-methyl-5-(4-methylphenyl)-1H-pyrazol-4-yl]-4-[(3S)-3-(1-piperidinyl)-1-pyrrolidinyl]-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine; CYP3cide; PF-04981517一管式病毒 DNA-RNAout50 次
考馬斯亮藍(lán) R-25010g
辣根過氧化物酶10mg
D/F12 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
柱式軟體 RNAout50 次
120308-15植物葉綠體純化試劑盒15 次
70503A-50DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (50-500 bp)50 次
腎系膜細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
DNA 酶,Ⅱ型80U
大提柱式動(dòng)物 RNAout5次
Protein A 瓊脂糖1mL
130648-200Afu 尿嘧啶 -DNA 糖基化酶200U
130995-25Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL
TBE 電泳液 ,10×250mL
碘5g
親和硅烷 25mL
海腎熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒100 次
131087-100堿性磷酸酶標(biāo)記親和素100mg
90702-20即用型長(zhǎng)片段 PCR 試劑盒20 次
脫氧膽酸10g

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