小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphA1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphA1圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該雜交瘤細(xì)胞由湖南遠(yuǎn)泰生物技術(shù)有限公司制備并提交，細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗，可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

3-（O-acetyloxime）， 5-chloro-1-[（2，5-dichlorophenyl）methyl]-1H-Indole-2，3-dione， C30， LDN 57444LDN-57444
t-Butyl-2-（（6S）-4-（4-chlorophenyl）-2，3，9-trimethyl-6H-thieno[3，2-f][1，2，4]triazolo[4，3-a][1，4]diazepin-6-yl）acetateBromodomain Inhibitor， （+）-JQ1
2，KT5823
N-（2-Methoxy-2-oxoacetyl）glycine methyl esterDMOG
L-Threoascorbic acid， Antiscorbutic factor， Vitamin CL-Ascorbic acid
4-（N-Maleimidomethyl）cyclohexane-1-carboxylic acid 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium saltSulfo-SMCC
Treponemycin； U 78548； C2989Borrelidin
（2R，4S）-ethyl 2-ethyl-4-（methoxycarbonyl）-6-（trifluoromethyl）-3，4-dihydroquinoline-1（2H）-carboxylate； CP-529414， CP529414， CP 529414Torcetrapib
N-（7-cyano-6-（4-fluoro-3-（2-（3-（trifluoromethyl）phenyl）acetamido）phenoxy）benzo[d]thiazol-2-yl）cyclopropanecarboxamideTAK-632
（1aR，Ingenol
Sodium Pneumocandin A0， 1-（（4R，5R）-4，5-dihydroxy-N2-（4-（5-（4-（pentyloxy）phenyl）-3-isoxazolyl）benzoyl]-L-ornithine）-4-（（4S）-4-hydroxy-4-（4-hydroxy-3-（sulfooxy）phenyl）-L-threonine）-Micafungin sodium
Methyl （4，6-diamino-2-（1-（2-fluorobenzyl）-1H-pyrazolo[3，4-b]pyridin-3-yl）pyrimidin-5-yl）（methyl）carbamate； RiociguatBAY 63-2521
N-Benzyl-2-（2，3-dihydro-1，4-benzoxazin-4-yl）-5，6，7，8-tetrahydroquinazolin-4-amine；CID49830260Ml241
Protease Inhibitor Cocktail II， EZBlockEZBlock Protease Inhibitor Cocktail II
T20 （TBS） Blocking BufferEZBlock T20 （TBS） Blocking Buffer
Biotinylated Bovine Serum Albumin （Biotin-LC-BSA） （12 biotin/BSA）Biotinylated Bovine Serum Albumin （Biotin-LC-BSA） （12 biotin/BSA）
（±）-2，2’-bis（8-Formyl-1，6，7-trihydroxy-5-isopropyl-3-methylnaphthalene； NSC 56817； NSC 524336； BL 193； Pogosin（±）-Gossypol
星孢菌素Staurosporine131088-5熒光素 (FITC) 標(biāo)記親和素5mg
90708-1.5即用型高保真 PCR 試劑盒1.5mL
脫氧膽酸5g
放線菌素 D 溶液 ,1mg/mL1mL
四甲基乙二胺25mL
T4 RNA 連接酶 2( 截短型 )2000U
CAS90-44-8蒽酮25g
120513-20即用型藍(lán)白 T 載體 C 型 (T7-T3，無 MCS)20 次
苷5g
鈷柱介質(zhì)10mL
庚烷磺酸1g
接頭 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol
CAS9004-54-0葡聚糖 T-50010g
12-107Rosetta-gami(DE3) 菌種1mL
液相內(nèi)毒素清除劑100 次
JM109 菌種1mL
芥子酸1g
pNPP 干粉1g
CAS50-23-7氫化可5g
131232-10壯觀溶液 ,50mg/mL10mL
吲哚 -3- 丁酸1g
聚乙二醇 4000250g
水解乳蛋白100g
小牛胸 DNA 溶液1mL
CAS25322-68-3聚乙二醇 8000250g