GFP標記的小鼠子宮頸癌細胞；U14-GFP圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱     GFP標記的小鼠子宮頸癌細胞；U14-GFP圖片       
形態(tài)特性      上皮細胞樣        
生長特性     貼壁生長        
特征特性      該細胞攜帶綠色滎光蛋白基因，可表達綠色滎光蛋白，可作為報告基因用于外源基因表達研究。         
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS         
傳代方法      1:3傳代,2-3天傳一代        
傳代情況     C7        
凍存條件      基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測     陰性         
STR      STR鑒定        
同工酶             
染色體             
使用權限     A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

 N-（4-chloropentyl） analog （100 ug）（1-（4-chloropentyl）-1H-indol-3-yl）（2，2，3，3-tetramethylcyclopropyl）methanone；  N-（4-chloropentyl） analog
Alexidine （hydrochloride） （50 mg）N1，N14-bis（2-ethylhexyl）-3，12-diimino-2，4，11，13-tetraazatetradecanediimidamide， dihydrochloride； Alexidine （hydrochloride）
3，4-MDMA （hydrochloride） （5 mg）N，α-dimethyl-1，3-benzodioxole-5-ethanamine， monohydrochloride； 3，4-Methylenedioxymethylamphetamine|NSC 168383； 3，4-MDMA （hydrochloride）
MT-45 （hydrochloride） （50 mg）1-cyclohexyl-4-（1，2-diphenylethyl）-piperazine， dihydrochloride； NSC 299236； MT-45 （hydrochloride）
（±）-β-Hydroxybutyrate-d4 （sodium salt） （1 mg）3-hydroxy-butyric-3，4，4，4-d4-acid， monosodium salt； β-Hydroxybutanoic Acid-d4； （±）-β-Hydroxybutyrate-d4 （sodium salt）
AKB48 N-（4-hydroxypentyl） metabolite （1 mg）N-（（3s，5s，7s）-adamantan-1-yl）-1-（4-hydroxypentyl）-1H-indazole-3-carboxamide； APINACA N-（4-hydroxypentyl） metabolite； AKB48 N-（4-hydroxypentyl） metabolite
MDL 28170 （50 mg）N-[（1S）-1-[[（1-formyl-2-phenylethyl）amino]carbonyl]-2-methylpropyl]-carbamic acid， phenylmethyl ester； Calpain Inhibitor III； MDL 28170
S3I-201 （10 mg）2-hydroxy-4-[[2-[[（4-methylphenyl）sulfonyl]oxy]acetyl]amino]-benzoic acid； NSC 74859； S3I-201甘油    CAS56-81-5    100mL
放線菌素 D 溶液 ,1mg/mL    120680-1    1mL
100mL    胰酶消化液 ( 無 EDTA)    
5mL    角質細胞生長因子    
100g    麥芽糖    
30 次    免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 試劑盒    
茚三酮    CAS485-47-2    10g
小鼠抗 T7 標簽單抗    130584-100    100μL
50 次    植物葉綠體蛋白提取試劑盒    
10g    L- 鳥氨    
500mg    崩潰酶    
250mL    超敏化學發(fā)光（HRP）檢測試劑盒 2.0     
莽草酸    CAS138-59-0    10mg
一站式長效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)    100908B-30    30 次
100 次    柱式質粒 DNAout    
5mg    硫氧還蛋白    
250U    苷脫氨酶    
50 T    GSH 試劑盒 ( 谷胱甘肽測試盒 )( 比色法 )    
梭菌蛋白酶    CAS9028-00-6    10μg
山羊抗兔 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記    131149-1000    1000μL
液體樣品 RNAout    80929-50    50 次
1g    N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯    
10mL    4× 核酸液相雜交液