小鼠雜交瘤細胞NC-4D12圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞NC-4D12圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

羥基脲    1g    
嗜熱菌蛋白酶    25mg    
CAS10034-99-8    硫酸鎂七水    100g
100835-1    胃蛋白酶抑制劑溶液，1 mg/mL    1mL
柱式凝固血液 DNAout    50 次    
馬來酸    100g    
ATP 溶液，1mM    1mL    
DNA 上樣液 ( 紅 ),6×    10mL    
JM83 菌種    1mL    
60609-200    T4 DNA 連接酶    200U
91202-50    雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)    50 次
Wortmannin(PI3K 抑制劑 )    0.5mg    
H-89(PKA 抑制劑 )    1mg    
L- 天門冬酰胺    25g    
多聚甲醛 - 氫氧化固定液    250 mL    
CAS21931-53-3    尿苷 -5'- 二磷酸    25mg
19-0110-500     IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )    500mL
130930-10    百萬堿基血液 DNAout    10 次
秋水仙素    100mg    
DAB 法生物素雜交試劑盒    5次   CHO-K1(倉鼠卵巢細胞亞株)5×106cells/瓶×2
FLAG標簽免疫親和介質125ul國產
小鼠視網膜色素上細胞*培養(yǎng)基100mL
BC-021(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腸粘膜上細胞*培養(yǎng)基100mL
7.5% NaHCO3溶液規(guī)格：100ml
人胎盤滋養(yǎng)層細胞*培養(yǎng)基100mL
McCown Woody Plant Vit Mix(Modified)BR100毫升國產/進口
人卵巢紫杉醇耐藥株英文名稱：A2780/Taxol
醋酸鉛培養(yǎng)基/乙酸鉛培養(yǎng)基/Lead Acetate Medium用于細菌的硫化氫試驗250克國產/進口
前列腺英文名稱：LNCaP
蠟樣芽孢桿菌計數顯色培養(yǎng)基250克國產/進口
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞（未分化）英文名稱：PC-12（未分化）
肉浸液肉湯培養(yǎng)基/肉浸液肉湯/Meat Infusion Broth溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)250克國產/進口
V79(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2
胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂/胰酶大豆酵母浸膏瓊脂/TSA-YE/TSYEA用于單核細胞和李斯特氏菌的分離培養(yǎng)250克國產/進口
RSC, 大鼠雪旺細胞