中國倉鼠卵巢細胞（亞系克?。籆HO-HCV-C說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 中國倉鼠卵巢細胞（亞系克?。?；CHO-HCV-C說明書
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  CHO-HCV-C細胞整合有丙型肝炎病毒的Core基因，能穩(wěn)定表達C蛋白，是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。 
培養(yǎng)條件  DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

 羊藿素    分子式：    286.28    分子量：    C16H14O5    英文名稱：    Herba    CAS號：    737-52-0    
 3,4-二羥基苯乙醇    分子式：    154.1632    分子量：    C8H10O3    英文名稱：    3,4- two hydroxy benzene ethanol    CAS號：    10597-60-1    
 羅漢果甜苷V    分子式：        分子量：        英文名稱：    Mogroside V    CAS號：        
鬼臼毒素    分子式：    414.41188    分子量：    C22H22O8    英文名稱：    Podophyllotoxin    CAS號：    518-28-5    
 醉椒素    分子式：    230.25916    分子量：    C14H14O3    英文名稱：    Drunk pepper    CAS號：    3155-48-4    
Z907 染料    分子式：    870.11    分子量：     C42H52N6O4RuS2    英文名稱：    Dye 907    CAS號：    502693-09-6    
 堿性紅14    分子式：    344.47264    分子量：     C23H26N3+    英文名稱：    Basic red 14    CAS號：    12217-48-0    
 派洛寧Y     分子式：    302.81    分子量：     C17H19N2OCl    英文名稱：    Luoning Y    CAS號：    92-32-0    
 麝香草酚藍    分子式：    466.59    分子量：     C27H30O5S    英文名稱：    Musk grass phenol blue    CAS號：    76-61-9    
 4-(2-THIENYL)BUT-3-EN-2-ONE    分子式：    152.21    分子量：     C8H8OS    英文名稱：    4- (2-THIENYL) BUT-3-EN-2-ONE    CAS號：    99768-07-7    1mg    重組蛋白 A    
甘油醛 -3- 磷酸脫氫酶    CAS9001-50-7    500UN
大腸桿零誘導培養(yǎng)基    120517-100    100mL
10mL    胰蛋白酶抑制劑，10mg/mL    
10mL    焦碳酸二乙酯    
1g    1,4- 雙丙烯酰    
10mL    4× 核酸液相雜交液    
煙酸    CAS59-67-6    25g
小鼠 RFP 標簽單抗    130582-1000    1000μL
5mg    植物血球凝集素 P    
25g    L- 亮氨酸    
25g    核黃素    
100mL    酚 - 混合液 (RNA 提取 )    
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B    CAS62610-50-8    100mL
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )    81203-20    20L
15 次    柱式植物葉綠體 DNAout    
10g    硫酸新    
100U    膽固醇酯酶    
100 T    GSH—ST 測試盒    
丁酰膽堿酯酶    CAS9001-08-5    500U
驢抗山羊 IgG，堿性磷酸酶標記    131148-60    60μL
柱式血液 RNAout    71202-50    50 次
10g    N ,N- 雙 (2- 羥乙基 ) 甘氨酸    
250 mL    4% 多聚甲醛 (RNA )    
5mL    平滑肌細胞生長因子    
5次    ECL 法地高雜交檢測試劑盒