BL21-CodonPlus(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL現(xiàn)貨產(chǎn)品及特點(diǎn)：

本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞，適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株，用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè)，本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域，該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒（pFastBac1，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂，Tn7R 和 Tn7L 之間包含慶大霉素抗性基因、昆蟲(chóng)病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后，發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid，提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲(chóng)病毒。此外，DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象，用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。菌株基因型為：F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
BL21-CodonPlus(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL現(xiàn)貨規(guī)格及成分：

BL21-CodonPlus(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL現(xiàn)貨使用方法：
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal，40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無(wú)菌的 SOC（不含抗生素），混勻后置于 37℃ 搖床， 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋，如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后，倒置平板， 37℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃，視平板上菌落生長(zhǎng)情況決定去留。

強(qiáng)壯根瘤菌 Rhizobium validum
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
RKO(人結(jié)腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
根瘤菌
TSCCa(人舌鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
溶藻弧菌 Vibrio alginolyticus
裂褶菌
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌 Lactococcus lactis
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
SDS-PAGE Loading Buffer (還原，5x)10ml國(guó)產(chǎn)
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金錢(qián)菌(金針菇) Flammulina velutipesDesulfovibrio medium (seawater)
Ferroglobus placidus medium
Half strength nutrient broth or agar
Hippea jasoniae medium
M17 medium (modified)
Medium with edta as carbon source
Methylobacterium thiocyanatum medium
Modified isp5 medium
Nutriment agar with 150g/l nacl
Prey seawater broth
Rhodobium medium
Spiribacter medium (830 + 12% marine salts)
BL21-CodonPlus(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL現(xiàn)貨Sulfurospirillum mv medium
Thermoplasma volcanium medium
TPT 18 medium
YMA medium (modified)
大腸桿菌DH5α（pir）菌種
釀酒酵母NMY51菌種