細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

名稱(chēng)    Kasumi-1 (急性原粒細(xì)胞白血病細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱(chēng) KASUMI-1; Kasumi 1; KASUMI1; Kasumi1

年齡（性別） 男；7歲

組織來(lái)源 外周血，急性原粒細(xì)胞白血病

生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 原粒細(xì)胞

背景描述 Kasumi-1細(xì)胞具有人急性淋巴白血病細(xì)胞的典型特征，是研究人急性淋巴白血病的材料。Kasumi-1細(xì)胞是一個(gè)帶有8：21號(hào)染色體轉(zhuǎn)位的白血病細(xì)胞株，這個(gè)轉(zhuǎn)位使得AML1基因和ETO(或稱(chēng)MTG8)基因串聯(lián)，使融合基因AML1-ETO(也稱(chēng)作AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)的表達(dá)升高，因而細(xì)胞產(chǎn)生嵌合的AML1-ETO蛋白。這個(gè)蛋白下調(diào)CEBPA mRNA、蛋白和DNA的結(jié)合活性，而這種結(jié)合對(duì)粒性白細(xì)胞的分化是重要的。Kasumi-1細(xì)胞建立于一位急性白血病患者的外周血，Kasumi-1細(xì)胞髓過(guò)氧化物酶陽(yáng)性，顯示其髓性成熟的形態(tài)。增生試驗(yàn)顯示，培養(yǎng)的Kasumi-1細(xì)胞對(duì)IL-3、IL-6、G-CSF(粒細(xì)胞集落刺激因子)、GM-CS(粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子)有響應(yīng)，但對(duì)IL-1和IL-5沒(méi)有響應(yīng)。在體外液體培養(yǎng)中分別加入二甲亞砜、G-CSF、IL-5，也沒(méi)有觀察到粒性或嗜酸性細(xì)胞的成熟。Kasumi-1細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，加入佛波酯可以看到誘導(dǎo)出的巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋20% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~48-72 hours

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2724 DSMZ; ACC-220

使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

巴氏醋桿菌巴氏亞種   Citreicellaaestuarii  模式菌株

拉曼被孢霉   鮑氏志賀菌CMCC51522凍干粉南京便診

蘇云金芽胞桿菌云南亞種Bacillusthuringiensissubsp.yunnanensis   青春雙歧桿菌

屎腸球菌ATCC35667凍干粉   乳酸鏈球菌

淡紫灰鏈霉菌   運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌
APC標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

Cy3標(biāo)記的兔抗人IgA
Kasumi-1 (急性原粒細(xì)胞白血病細(xì)胞)大鼠骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1(ACTα1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I(TNNI1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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