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NCI-H661 (大細胞肺癌細胞)

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-02 13:54:37瀏覽次數(shù):311次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0298 應用領域 化工
主要用途 僅供科研使用
NCI-H661 (大細胞肺癌細胞)公司其它各種產品人白細胞分離液 1.078200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個
人中性粒細胞分離液 1.085200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個
人粒細胞分離液 1.113200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個
小鼠腫瘤細胞分離液 1.070200mL

培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

產品屬性:

產品名稱

NCI-H661 (大細胞肺癌細胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0298

名稱    NCI-H661 (大細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱 H661; H-661; NCIH661

種屬 人類

年齡(性別) 男性,43

組織來源

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

背景描述 NCI-H661細胞源自一位43歲患有大細胞肺癌的男性白人的淋巴結;NCI-H661細胞缺乏產生粘液和鱗狀分化的亞顯微結構和生化證據。NCI-H661細胞表達的p53mRNA易于檢測,明顯高于正常肺細胞的水平,與此同時,沒有出現(xiàn)總體性的結構DNA崎變,它們可以說明存在點突變或很小的變異。NCI-H661細胞角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性,神經絲三聯(lián)體蛋白陰性。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3/

倍增時間 ~60小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO2,5%

溫度:37

保藏機構 ATCC; HTB-183

實驗報告:
產品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2
PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3
、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5
、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級10mL  NP-40 裂解液100mL

水蛭素溶液,2mg/mL0.1mL  Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 )5mg

亮抑蛋白酶肽溶液,10 mg/mL1mL  NMY51 酵母感受態(tài)細胞10×100μL

木瓜蛋白酶抑制劑溶液,0.5 mg/mL10mL  Nile Red25mg

胃蛋白酶抑制劑溶液,1 mg/mL1mL  Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )10g
蜥蜴雌二醇(E2)elisa檢測試劑盒

蜥蜴25羥基(25-OHC)elisa檢測試劑盒

蜥蜴17羥孕酮(17-OHP)elisa檢測試劑盒免費代測

鯊魚elisa檢測試劑盒

鯊魚孕激素/孕酮(PROG)elisa檢測試劑盒
NCI-H661 (
大細胞肺癌細胞)大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa檢測試劑盒

大鼠白介素1受體樣1(IL1RL1)elisa分析檢測試劑盒

大鼠白介素1受體樣1(IL1RL1)elisa檢測試劑盒

大鼠白介素1受體樣1(IL1RL1)elisa檢測試劑盒免費代測

大鼠白介素2(IL-2)elisa分析檢測試劑盒

冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


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