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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞系>> CRT (神經膠質瘤細胞)

CRT (神經膠質瘤細胞)

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-02 13:38:55瀏覽次數(shù):215次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0268 應用領域 化工
主要用途 僅供科研使用
CRT (神經膠質瘤細胞)公司其它各種產品前列腺上皮細胞生長因子5mL dNTP 溶液,100mM 0.5mL
前脂肪細胞生長因子5mL dNTP 溶液 ,10mM5mL
乳腺上皮細胞生長因子5mL dNTP 溶液 ,10mM0.5mL
上皮細胞生長因子5mL dNTP 溶液 ( 標記專用 )0.5mL
上皮細胞生長因子 -25mL dNTP 和引物清除劑100 次
DNA 尿素 -PA

產品屬性:

產品名稱

CRT (神經膠質瘤細胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0268

名稱    CRT (神經膠質瘤細胞)
生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

生長培養(yǎng)基 DMEM10% FBS1% P/S

推薦換液頻率 2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO2,5%

溫度:37

冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實驗報告:
產品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2
PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3
、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5
PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
DNA 電泳分子量標準 (3)λ/EcoR I+ Hind III50   氣相 RNase 清除劑120mL

DNA 電泳分子量標準 (3)pBR322/BstN I50   葡萄球菌 RNAout50

DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae 50   平滑肌細胞生長因子5mL

DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hinc 50   平滑肌細胞生長因子 ( 不含血清 )5mL

Southern 專用 DNA Marker(  )20   嘌呤霉素干粉25
15 - 酮基-13,14-二氫前列腺素F2α(15-keto-13,14-dihydro-PGF2α)elisa檢測試劑盒

鴿子elisa檢測試劑盒免費代測

鴿子脂聯(lián)素(ADP)elisa檢測試劑盒

鴿子胃泌素(Gastrin)elisa檢測試劑盒

鴿子胃動素(MTL)elisa檢測試劑盒
CRT (
神經膠質瘤細胞)大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa分析檢測試劑盒

大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa檢測試劑盒

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大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa分析檢測試劑盒

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