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Ishikawa (子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞)

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-02 13:38:20瀏覽次數(shù):266次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0281 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用
Ishikawa (子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞)公司其它各種產(chǎn)品Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL Dansyl chloride 100mg
Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次
Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )1mg DAB 法雜交試劑盒5次
AG490(JAK 抑制劑

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

Ishikawa (子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0281

名稱    Ishikawa (子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 ISHIKAWA; ISHI

種屬 人類

年齡(性別) 39

組織來源 子宮

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3/

倍增時(shí)間 ~32-40小時(shí)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37

保藏機(jī)構(gòu) ECACC; 99040201

冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min
2
、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5
、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
DNA 修復(fù)混合液 150   鯡魚精 DNA 溶液1mL

即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL  非酶多糖清除劑 (RNA 專用 )10mL

即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL  非酶多糖清除劑 (DNA 專用 )50

探針標(biāo)記專用 PCR Mix 0.5mL  非酶 RNA 清除劑 2.01.5mL

即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL  非酶 RNA 清除劑 1.01.5mL
魚葡萄糖激酶(GCK)elisa檢測試劑盒

魚葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測

(Cortisol)elisa檢測試劑盒

魚內(nèi)皮素1(ET-1)elisa檢測試劑盒

魚免疫球蛋白M(IgM)elisa檢測試劑盒
Ishikawa (
子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞)大鼠阿黑皮素原(POMC)elisa檢測試劑盒

大鼠阿黑皮素原(POMC)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測

大鼠阿立新A(Orexin A)elisa分析檢測試劑盒

大鼠阿立新A(Orexin A)elisa檢測試劑盒

大鼠阿米洛利敏感鈉離子通道蛋白1α(SCNN1α)elisa檢測試劑盒


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