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SPC-A-1 (肺腺癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-02 12:42:56瀏覽次數(shù):320次

聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0217 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用
SPC-A-1 (肺腺癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)公司其它各種產(chǎn)品小 RNA 克隆試劑盒10 次 Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )10L
通用 miRNA 克隆接頭0.83nmol Tricine-SDS-PAGE 上樣液5mL
克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液20 次 Tricine-SDS-PAGE 上樣液1mL
菌落 PCR 試劑盒 2.050 次 Tricine-SD

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

SPC-A-1 (肺腺癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0217

名稱    SPC-A-1 (肺腺癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)
別稱 SPC-A-1; SPCA1

年齡(性別)

組織來源 肺癌

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 SPC-A-1細(xì)胞源自一位男性肺腺癌患者。SPC-A-1細(xì)胞是一株常用的肺癌細(xì)胞系,也被用于肺癌發(fā)病機理和抗腫瘤藥物的體外研究試驗研究;SPC-A-1細(xì)胞具有典型的上皮細(xì)胞狀形態(tài)結(jié)構(gòu)。(STR檢測位點同HELA)

生長培養(yǎng)基 RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO2,5%

溫度:37

實驗報告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2
、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3
、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5
、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
cDNA 第一鏈合成試劑盒10   非變性蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)25mg

cDNA 第一鏈合成試劑盒50   二氯異溶液,10mg/mL5mL

AMV cDNA 第一鏈合成試劑盒30   多粘菌素 B 硫酸鹽5mL

miRNA cDNA 第一鏈合成試劑盒25   動植物總蛋白微量提取試劑盒50

miRNA 熒光定量檢測試劑盒25   動植物膜蛋白微量制備試劑盒50
大鼠α干擾素(IFN-α)elisa檢測試劑盒

大鼠α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)elisa檢測試劑盒免費代測

大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)elisa檢測試劑盒

大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)elisa檢測試劑盒

大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)elisa檢測試劑盒
SPC-A-1 (
肺腺癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)elisa檢測試劑盒

大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白3(DKK3)elisa檢測試劑盒

大鼠Disabled同源物1(DAB1)elisa檢測試劑盒

大鼠Discs大同源物4(DLG4)elisa檢測試劑盒

大鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)elisa分析檢測試劑盒

冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


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