細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

名稱    HT-29 (結(jié)腸癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 HT 29; HT29

種屬 人類

年齡（性別） 女性，44歲

組織來(lái)源 結(jié)直腸腺癌

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 HT-29細(xì)胞是由J·Fogh在1964年用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的；近來(lái)，已建株的培養(yǎng)細(xì)胞用含相同血清McCoy's5A培液培養(yǎng)。HT-29細(xì)胞在裸鼠中致瘤，也能在類固醇處理的地鼠中致瘤。HT-29細(xì)胞合成IgA、CEA、蛋白綁定TGF-β的分泌成分和粘液素等。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~36-60小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.

受體表達(dá)情況 human adrenergic alpha2A, urokinase receptor (u-PAR), vitamin D (moderate expression), urokinase receptor (u-PAR); vitamin D (moderate expression), human adrenergic alpha2A

基因表達(dá)情況 secretory component of IgA; carcinoembryonic antigen (CEA); transforming growth factor beta binding protein; mucin, myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV).

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-38 BCRJ; 0111 CCLV; CCLV-RIE 0960 DSMZ; ACC-299 ECACC; 91072201

使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL  Dansyl chloride 100mg

Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL  DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次

Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )1mg  DAB 法雜交試劑盒5次

AG490(JAK 抑制劑 )5mg  Cyclosporin A( 免疫抑制劑 /PP2B 抑制劑 )50mg

AICAR(AMPK 激活劑 )5mg  Cycloheximide50m
大鼠激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)elisa檢測(cè)試劑盒
HT-29 (結(jié)腸癌細(xì)胞)倉(cāng)鼠脂聯(lián)素,含C1Q和膠原域(ADIPOQ)elisa分析檢測(cè)試劑盒

倉(cāng)鼠脂聯(lián)素,含C1Q和膠原域(ADIPOQ)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

倉(cāng)鼠脂氧素A4(LXA4)elisa分析檢測(cè)試劑盒

倉(cāng)鼠脂氧素A4(LXA4)elisa檢測(cè)試劑盒

倉(cāng)鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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