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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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HCC827 (非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌R&D/美國(guó)

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-02 10:32:54瀏覽次數(shù):160次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0093 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用
HCC827 (非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)公司其它各種產(chǎn)品硅膠膜離心吸附柱 ( 大提 ) 收集管1只 糖蛋白 PAGE 染液1套
硅膠膜離心吸附柱再生液500 次 探針標(biāo)記專用 PCR Mix 0.5mL
酸洗玻璃珠系列10g 痰液采集器1個(gè)
硅基磁珠2mL 痰液 DNAout50 次
氨基磁珠2mL 羧基磁珠2mL
天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )20 次 電泳級(jí)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

HCC827 (非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X0093

名稱    HCC827 (非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 HCC-827; HCC0827

種屬 人類

年齡(性別) 女性,39

組織來(lái)源 肺腺癌

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 HCC827細(xì)胞是于19943月建系,組織提供者在25歲到26歲時(shí)每個(gè)月抽1包煙,在診斷前12年不再抽煙。HCC827細(xì)胞在EGFR激酶區(qū)域有一個(gè)獲得性突變(E746-A750缺失)

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3/

倍增時(shí)間 ~28-60小時(shí)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2868 BCRJ; 0351 DSMZ; ACC-566

冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無(wú)菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2
、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3
PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5
、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框35抗體

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體
大鼠可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠可溶性白介素-2 受體(sIL-2R)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)elisa檢測(cè)試劑盒
HCC827 (
非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)半(Cys)含量測(cè)試盒

Cys含量測(cè)試盒 50T/48 比色法

半乳糖含量測(cè)試盒

半纖維素含量測(cè)試盒

胞漿蛋白提取試劑盒100T


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