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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>真核蛋白/EP>> N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)真核蛋白人

N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)真核蛋白人

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2023-03-22 10:25:37瀏覽次數(shù):275次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D3067 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Eukaryotic N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASA
物種 Homo sapiens (Human,人)
N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)真核蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:核苷酸結(jié)合蛋白3樣蛋白抗體 英文名稱:GNL3L 0.2ml溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體 英文名稱:GNPTAB 0.2ml促釋放激素2抗體 英文名稱:GNRH2 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase Kinase 5 (MAP4K5)產(chǎn)品名稱:絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶5(MAP4K5)重組蛋白物種:Human,人MAP4-K5; GCKR; KHS; KHS1; MAPKKKK5; Germinal Center Kinase-Related; Kinase homologous to SPS1/STE20

Recombinant Guanidinoacetate-N-Methyltransferase (GAMT)產(chǎn)品名稱:胍乙酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GAMT)重組蛋白物種:Mouse,小鼠PIG2; TP53I2; Guanidinoacetate Methyltransferase; Guanidinoacetate Transmethylase; Methionine-Guanidinoacetic Transmethylase; Guanidoacetate Methyltransferase

Recombinant Alanine Aminotransferase (ALT)產(chǎn)品名稱:谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白物種:Cattle,牛GPT; ALAT; SGPT; AAT1; GPT1; Serum Glutamic Pyruvic Transaminase; Alanine Transaminase; Glutamate pyruvate transaminase 1; Glutamic--alanine transaminase 1

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)真核蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D3067

 

 

英文名稱:Eukaryotic N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)

HNAC1; non-lysosomal ceramidase; Neutral ceramidase

型號:GOY-01D3067

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:真核表達(dá)

宿主293F cell

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測分子量:106.0kDa

實(shí)際分子量:100kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Phe99~Ile780 with N-terminal His Tag and C-terminal Fc Region of Human IgG1

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 80%

等電點(diǎn):7.2

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

NCI-H838(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

鹽水蘇堿;Stachydrine hy 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

異阿魏;3-Hydroxy-4-met 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 MDA-MB-435(人腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

;Ephedrine hydr 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 M14(人黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

鳶尾苷元磺鈉;tectorigenin 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 MADB106(大鼠腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

原人參三;Proanaxatri 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 HFT-8810(人胎兒胸腺細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2

原人參二;Proanaxdiol 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 A2780(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

異鼠李素;Isorhamnetin 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 COS/猴腎細(xì)胞株株國產(chǎn)

羽扇豆;Lupeol 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)真核蛋白人雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管(含小倒管) Double Lactose Bile Ferment Broth 10ml*20支

M17肉湯 M17 Broth 250g

1瓶 Reh細(xì)胞株 Reh 低溫運(yùn)輸和保存

0.25mL UTP溶液,100mM UTP Solution -20℃保存

改良EC(mEC+n)肉湯 Modified EC Enrichment Broth 10ml*20支/包

厭氧培養(yǎng)液 BL Agar Medium Base 250g

小鼠白介素18(IL-18)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

DTM培養(yǎng)基 DTM Medium 250g

小鼠高半胱(Hcy)免疫試劑盒

人血小板生成素(TPO)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1瓶 FaDu細(xì)胞株 FaDu 低溫運(yùn)輸和保存

 


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