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人小細胞肺癌細胞；NCI-H446*操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

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細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁/懸浮生長，混合
特征特性  該細胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達神經(jīng)元*的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。與正常細胞相比，該細胞c-myc DNA序列擴增約20倍，RNA增加15倍。zui初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640，另外添加10 nM氫的松、0.005 mg/ml胰島素、0.01 mg/ml轉(zhuǎn)鐵 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(87+5)
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類

運輸保存：
采用干冰保存運輸。收到細胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研。
儲存：液氮。
運輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性，支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker，（如證明細胞錯誤，全額退款。）公司針對每株細胞，鑒定gene background，鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細胞的真實性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>

組織人類巨細胞病毒蛋白酶（HCMV PROTEASE）活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒    進口/國產(chǎn)    規(guī)格：    20次
血液人類巨細胞病毒蛋白酶（HCMV PROTEASE）活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒    進口/國產(chǎn)    規(guī)格：    20次
體液人類巨細胞病毒蛋白酶（HCMV PROTEASE）活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒    進口/國產(chǎn)    規(guī)格：    20次
細胞3C類蛋白酶（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒    進口/國產(chǎn)    規(guī)格：    20次
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細胞艾滋病毒1蛋白酶（HIV-1 PROTEASE）活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒    進口/國產(chǎn)    規(guī)格：    20次
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細胞切割酶/β分泌酶（MENAPSIN 2；β－SECRETASE）活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒    進口/國產(chǎn)    規(guī)格：    20次
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細胞蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑盒    進口/國產(chǎn)    規(guī)格：    20次

1S,2S)-N,N'-Dimethyl-1,2-cyclohexanediamine(1S,2S)-(+)-N,N'-二基-1,2-環(huán)己87583-89-9
Stannous methanesulfonate基磺酸錫53408-94-9
Sodium 1-naphthalenesulfonate1-萘磺酸130-14-3
23-0500-2NAC( 抗氧化劑 )2g
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )50L
醛縮酶100mg
冷啟動核酸酶10,000U